Xác định khả năng sinh kháng sinh của vi sinh vật . Phân lập giống vi sinh vật - Cân 1g đất - Nghiền đất trong cối sứ - Hoà đất với 10ml nước vô khuẩn - Cho vào bình tam giác dung tích 200ml với 90ml nước vô khuẩn - Tiến hành pha loãng cho tới khi tách được từng tế bào riêng biệt. - Tách tế bào trên môi trường thạch đĩa bằng phương pháp cấy gạt - Ủ thạch đĩa ở 370C trong 1-2 ngày - Khi khuẩn lạc nhỏ hình thành, phân lập và. | Thí nghiệm vi sinh vật học Xuân Phương BÀI 8 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH KHẢ NĂNG TẠO SẢN PHẢM BẬC HAI Ở VI SINH VẬT I. Xác định khả năng sinh kháng sinh của vi sinh vật . Phân lập giống vi sinh vật - Cân 1g đất - Nghiền đất trong cối sứ - Hoà đất với 10ml nước vô khuẩn - Cho vào bình tam giác dung tích 200ml với 90ml nước vô khuẩn - Tiến hành pha loãng cho tới khi tách được từng tế bào riêng biệt. - Tách tế bào trên môi trường thạch đĩa bằng phương pháp cấy gạt - Ủ thạch đĩa ở 370C trong 1-2 ngày - Khi khuẩn lạc nhỏ hình thành phân lập và nuôi trên môi trường thạch nghiêng. - Dùng các giống đã phân lập nuôi chúng trong môi trường lỏng ở máy lắc nhiệt độ phòng. - Xác định hoạt tính chất kháng sinh - Xác định hoạt tính chất kháng sinh được tạo ra trong dung dịch lên men như trình bày dưới đây. . Xác định hoạt tính chất kháng sinh a Phương pháp kiểm tra sơ bộ phương pháp Kolmen và Boerner - Trên môi trường thạch đĩa cấy vi sinh vật kiểm tra theo một đường thẳng. - Ủ trong điều kiện nhiệt độ bình thường - Sau đó cấy vi khuẩn có khả năng bị ức chế bởi kháng sinh nghiên cứu - Đem ủ ở nhiệt độ tương tự như trên - Sau 3-4 ngày nhận xét và ghi kết quả. Nếu vi sinh vật có khả năng ức chế thì sẽ xuất hiện vùng vô khuẩn - vùng không có sự phát triển của vi sinh vật. b Phương pháp thỏi thạch - Nuôi cấy vi sinh vật vào thạch đĩa - Dùng cái đột nút cao su ấn nhẹ lên thỏi thạch và lấy thỏi thạch ra. - Dùng kẹp vô khuẩn ấn thỏi thạch vào đĩa thạch đã nuôi vi sinh vật kiểm định và đặt thỏi thạch vào chỗ cũ. Nuôi chúng trong điều kiện phòng thí nghiệm sau đó lấy ra đo vòng vô khuẩn xung quanh lỗ đục. c Phương pháp dùng ống thép không gỉ 77 Thí nghiệm vi sinh vật học Xuân Phương - Cấy vi sinh vật kiểm định vào đĩa petri với môi trường thạch dinh dưỡng theo phương pháp đổ đĩa - Khi thạch đông dùng kẹp vô khuẩn gắp 6 ống thép không gỉ đặt nhẹ nhàng vào 6 vị trí đều nhau trên mặt thạch. Ôúng thép không gỉ có chiều caoG0 1mm đường kính bên ngoài 8mm đường kính trong 6mm. Nếu
