Nghiên cứu tương tác protein có ý nghĩa quan trọng nhằm xác định chức năng và sự tham gia của chúng vào một hay nhiều hoạt động sống cụ thể như quá trình phân chia tế bào, sao chép DNA, tổng hợp protein hay vận chuyển tín hiệu. | SỬ DỤNG KỸ THUẬT DI TRUYỀN TRONG NGHIÊN CỨU TƯƠNG TÁC PROTEIN Dương Văn Hợp Trung tâm Công nghệ Sinh học Đại học Quốc gia Hà nội Sokolenko Viện CNSH Thực vật. Đại học Tổng hợp . I. GIỚI THIỆU Nghiên cứu tương tác protein có ý nghĩa quan trọng nhằm xác định chức năng và sự tham gia của chúng vào một hay nhiều hoạt động sống cụ thể như quá trình phân chia tế bào sao chép DNA tổng hợp protein hay vận chuyển tín hiệu. Trên thực tế có nhiều phương pháp khác nhau dùng cho nghiên cứu tương tác protein như sắc kí ái lực Affinity chromatography kết tủa miễn dịch Immunopricipitate tạo liên kết chéo Cross-linking . Phương pháp sắc ký ái lực được thực hiện như sau protein nghiên cứu được cố định trên một chất mang ví dụ agarose Sephadex . Sau đó mẫu chứa protein tương tác được cho đi qua cột và chúng bị giữ lại. các protein bám này được tách ra khỏi cột bằng các dung dịch thích hợp như SDS muối NaCl dung môi hữu cơ. người ta đã sử dụng phương pháp này để tách các protein tương tác với RNAaza từ 25 năm trước đây. 1 . Phương pháp kết tủa miễn dịch dựa vào phản ứng kháng nguyên với kháng thể. ở đây người ta dùng chất mang Sepharose gắn với protein A tương tác với kháng thể để kết tủa phức hệ kháng nguyên kháng thể đồng thời kéo theo các protein khác tương tác với protein nghiên cứu kháng nguyên . Các protein kết tủa cùng sẽ được tách ra để nghiên cứu 2 Phương pháp tạo các liên kết chéo. Với phương pháp này thì liên kết chéo giữa các protein tương tác với nhau nhờ một tác nhân ví dụ gluceraldehite . Sau đó phức hệ được tách ra và phân tích khi dùng điện di hai chiều để phát hiện khả năng hai protein có tương tác với nhau 3 Năm 1989 Stan Field 4 lần đầu tiên giới thiệu phương pháp sử dụng kỹ thuật di truyền để nghiên cứu tương tác protein có tên là hệ thống lai kép Two hybride system . Phương pháp này có nhiều ưu việt hơn hắn các phương pháp khác. Đặc biệt là độ chính xác và độ nhạy cao mà không phương pháp nào có thể đạt lý của phương pháp này có
