Khả năng tái sinh của cây trồng nói chung phụ thuộc nhiều vào kiểu gen của thực vật. Đối với cây ngô, vấn đề tái sinh gặp rất nhiều khó khăn, ngoại trừ một số dòng có khả năng tái sinh cao, được sử dụng làm vật liệu chuyển gen như: A188, H99, HiII hầu hết các dòng ngô khác có khả năng tái sinh kém (1). | ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG VÀ TUỔI PHÔI ĐẾN KHẢ NĂNG TÁI SINH CÂY TỪ PHÔI NON DÒNG NGÔ NHẬP NỘI HR8 HR9 Phạm Thị Lý Thu Phạm Minh Thợi Lê Huy Hàm Đỗ Năng Vịnh Viện Di truyền nông nghiệp ĐẶT VẤN ĐỀ Khả năng tái sinh của cây trồng nói chung phụ thuộc nhiều vào kiểu gen của thực vật. Đối với cây ngô vấn đề tái sinh gặp rất nhiều khó khăn ngoại trừ một số dòng có khả năng tái sinh cao được sử dụng làm vật liệu chuyển gen như A188 H99 HiII. .hầu hết các dòng ngô khác có khả năng tái sinh kém 1 . Mặt khác khả năng tái sinh còn phụ thuộc vào môi trường nuôi cấy và một số yếu tố khác. Việc nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy và tái sinh ở cây ngô còn hạn chế. Trong khuôn khổ bài báo này chúng tôi trình bày kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố môi trường và tuổi phôi nuôi cấy đến khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây từ phôi non trên cơ sở các dòng ngô nhập nội có khả năng tái sinh cao HR8 và HR9. Hai dòng ngô này có nguồn gốc ôn đới đã được trồng và xác định thời vụ sinh trưởng thích hợp trong điều kiện Việt nam 10 . VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Vật liệu Các dòng ngô được sử dụng trong nghiên cứu gồm hai dòng ngô nhập nội HR8 và HR9 là 2 dòng có khả năng tái sinh cao do Viện Công nghệ liên bang Thuỵ sỹ ETH cung cấp Cây ngô mẹ cho bắp thí nghiệm được trồng trong nhà lưới từ tháng 10 2000 đến tháng 4 2003. Phương pháp Bắp non sau khi thụ phấn khoảng 18-24 ngày được thu để tách phôi. Mẫu bắp thí nghiệm được giữ ở 40C thời gian từ 2-10 ngày trước khi tách phôi. Khử trùng bề mặt ngoài của bắp bằng ethanol 700 bóc bỏ các lá bao ngoài và tách phôi trong điều kiện vô trùng. Phôi non được cấy trong môi trường nuôi cấy với phần tế bào vảy hướng lên trên phần trụ phôi tiếp xúc với bề mặt môi trường Green and Phillips 1975 . Các phôi có kích thước khác nhau từ 0 5-3mm được sử dụng trong thí nghiệm. Mật độ cấy 15 phôi đĩa Petri chứa 8mml môi trường. .Mỗi công thức thí nghiệm được làm với 12 đĩa tương ứng với 180 phôi tách từ 3 bắp. Môi trường nuôi cấy
