Lipase (triacylglycerol acylhydrolases, EC ) xúc tác phản ứng thủy phân triglyceride ở giao diện cơ chất và nước [1] và được ứng dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực công nghiệp như bột giặt, sữa, chuẩn đoán bệnh, chế biến dầu, chuyển hóa sinh học, và đồng phân nhờ một số đặc tính như đặc hiệu cơ chất, vị trí, chọn lọc đồng phân, bền nhiệt và kiềm [2]. | BIỂU HIỆN CAO LIPASE KIỀM VÀ CHỊU NHIỆT CỦA CHỦNG RALSTONIA SP. M1 Ở . Quyền Đình Thi Lê Thị Thu Giang Nguyễn Thị Thảo Viện Công nghệ Sinh học Viện Khoa học và Công nghệ Quốc gia Jung Kee Lee Tae-Kwang Oh Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology Korea MỞ ĐẦU Lipase triacylglycerol acylhydrolases EC xúc tác phản ứng thủy phân triglyceride ở giao diện cơ chất và nước 1 và được ứng dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực công nghiệp như bột giặt sữa chuẩn đoán bệnh chế biến dầu chuyển hóa sinh học và đồng phân nhờ một số đặc tính như đặc hiệu cơ chất vị trí chọn lọc đồng phân bền nhiệt và kiềm 2 . Lipase vi khuẩn Family I được chia thành 7 Subfamily dựa vào mức độ tương đồng trình tự amino acid 2 . Lipase Subfamily P. aeruginosa 3 4 Acinetobacter sp. 5 6 P. fragi 7 etc và B. glumae 8 B. cepacia 9 C. viscosum 10 P. luteola 11 Ralstonia sp. M1 12 etc có độ tương đồng trình tự amino acid cao 33 13 và hầu hết chúng còn có một đặc điểm chung khác là gene lipase luôn luôn gắn kết với gene thứ hai nằm ngay sau 35 9 12 14 hoặc trước gene lipase 6 . Gene thứ hai mã hóa một protein được gọi là lipase-specific foldase modulator activator helper protein hoặc chaperone cần thiết để hoạt hóa lipase và tiết lipase ngoại bào. Trong nghiên cứu trước gene lipA và gene lipB lần lượt mã hóa lipase và chaperone chủng Ralstonia sp. M1 đã được nhân dòng phân tích và xác định thuộc họ phụ Burkholderia lipase chaperone 12 . Trong bài báo này chúng tôi biểu hiện năng suất cao lipase hoàn thiện LipA và chaperone LipBhis đã cắt 56aa ở E. coli BL21 dưới sự điều khiển của T7 promoter. Cả hai protein được tinh sạch và lipase được hoạt hóa với chaperone. Một số tính chất hóa lý của lipase tái tổ hợp được nghiên cứu. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Dầu olive được mua của Sigma Mỹ Bacto-tryptone và cao nấm men của Difco Korea . Enzyme hạn chế CIAP T4 ligase do Roche Korea cung cấp. DNA Gel-Extraction Kit và Ni-NTA-matrice được mua của QIAGEN PCR mix và Minipreps của .
