Tham khảo tài liệu 'giáo trình di truyền học và vi sinh vật ứng dụng part 9', khoa học tự nhiên, công nghệ sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | 187 ứng đã được tinh khiết và đánh dấu phóng xạ P32 mẫu RNA này được gọi là vật dò phóng xạ radioactive probe . Nếu dòng nào có chứa DNA mã hoá cho mRNA thì sẽ xảy ra hiện tượng lai giữa mRNA và vùng sợi đơn tương ứng trên DNA đó. Sau khi loại bỏ các mRNA không lai được người ta đặt một miếng phim ảnh lên trên màng lọc những vết ảnh xuất hiện trên ảnh phóng xạ tự ghi cho thấy vị trí của dòng mang DNA bổ trợ với mẫu RNA Hình . Từ đây có thể tách riêng các dòng lai đặc hiệu để sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo. Hình minh họa các công đoạn của quy trình thí nghiệm DNA tái tổ hợp ở vi khuẩn E. coli khi sử dụng môi trường nuôi cấy có bổ sung ampicillin đối với ba kiểu tế bào tế bào có mang plasmid tái tổ hợp tế bào chỉ mang plasmid pUC19 không tái tổ hợp và tế bào không biến nạp được hình . Qua đêm sinh trưởng các tế bào nào có mang plasmid tái tổ hợp và plasmid không tái tổ hợp sẽ mọc thành các khuẩn lạc màu sắc tương ứng ở đây là trắng và xanh hình . Sau khi chọn ra các dòng có xen plasmid tái tổ hợp đưa lên màng lọc và cho tiến hành lai hóa giữa RNA và DNA-gene của nó bằng các vật dò phóng xạ như đã nói ở trên. Sau đó đưa sản phẩm lai phân tử này lên tấm phim X quang để định vị gene quan tâm từ dòng tái tổ hợp hình . Chọn lọc các tế bào truyền gene kháng với chất kháng sinh Vector plasmid chứa một gene kháng ampicillin làm cho tế bào có tính kháng. Sự sinh trưởng của các tế bào được biến nạp các tế bào tiếp nhận plasmid có thể được xác định trên môi trường agar có chứa ampicillin chẳng hạn. được biến Tế bào Môi trường dinh dưỡng X-gal Sinh trưởng qua đêm Các dòng kháng ampicillin Sự phát sinh đột biến xen đoạn cho phép xác định các plasmid mang DNA xen đoạn 188 Xác định các dòng Vector plasmid có chứa gene có thể xác định được ví dụ một khả năng kháng thuốc thứ hai hoặc hoạt tính của Tế bào pUC19 ITế bào pUC19 Tế bào không đoạn xen được biến nạp Môi trường dd ampicillin X-gal enzyme với trình tự mã hoá của gene này chứa vị trí giới hạn .
