Tham khảo tài liệu 'giáo trình thực tập vi sinh vật chuyên ngành part 6', khoa học tự nhiên, nông - lâm phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | violet gentian khuẩn lạc vẫn không bị nhuộm màu. Vi khuẩn gram âm không bào tử di động nhờ tiên mao. 3. Xác định khả năng cố định nitơ . Thí nghiệm trồng cây trong ống thạch Phương pháp này cho phép nhận biết có khả năng cố định nitơ của vi khuẩn nốt rễ. Môi trường dùng để trồng cây gây nhiễm Môi trường Jenhsen 1942 hoặc môi trường Thornton 1930 Môi trường Jenhsen Môi trường Thornton CaHPO4 1 0g CaHPO4 2 0g K2HPO4 0 2g K2HPO4 0 5g 0 2g 0 2g FeCl3 0 1g NaCl 0 1g Nước 1000ml Nước 1000ml Thạch 8 - 15g Thạch 8 - 15g pH 6 5 - 7 0 pH 6 5 - 7 0 Có thể dùng ống môi trường thạch nghiêng hoặc đứng. Dùng dung dịch dinh dưỡng Gibson 1963 1ml lit môi trường. Thành phần dung dịch vi lượng nh sau H3PO3 0 05g NH4 2MoO4 0 05g KCl 0 005g NaBr 0 005g ZnSO4 0 003g Al SO4 .18H2O 0 003g MnSO4 0 002g Nước cất 1000ml Chuẩn bị ống môi trường ống nghiệm 150 x 20mm cho hạt đậu nhỏ ống nghiệm 200 x 30mm cho hạt đậu lớn Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội - Giáo trình thực tập vi sinh vật chuyên ngành .49 Lượng môi trường cho vào theo bảng sau Cỡ ống nghiệm Thạch đứng Thạch nghiêng mm ml ml 150 x 20 8 12 150 x 25 12 18 150 x 30 18 30 200 x 30 25 40 Cho môi trường trồng cây theo bảng hướng dẫn trên. Nút bông và khử trùng ở 1at trong 20 phút. Sau đó đặt nghiêng nếu cần trồng cây trên ống thạch nghiêng. Chuẩn bị hạt giống Chọn hạt giống sạch không bị tổn thương. Khử trùng bằng etanol 95 . Ngâm trong 3 phút hoặc 0 2 HgCl2 được axit hóa 50ml lít HCl . Hạt được khử trùng phải được rửa sạch bằng nước vô trùng ít nhất là 5 lần. Sau đem ủ cho nẩy mầm ủ trên giấy lọc ẩm vô trùng hoặc ủ trên môi trường thạch đĩa hoặc trên cát vô trùng . Nhiễm khuẩn Những hạt đã nảy mầm được đưa ra một đĩa vô trùng. Cho dịch vi khuẩn vào. Hạt được nhiễm khuẩn có thể trồng ngay vào ống thạch vô trùng hoặc để sau 7 ngày rồi mới trồng tốt hơn là để sau 7 ngày vào ống nghiệm. 3. 2. Gieo trồng cây vào ống nghiệm Những ống nghiệm đã được khử trùng đem đặt lên giá sắt thay cho nút bông đầu ống nghiệm môi .
