Quy định chung Môi trường nuôi cấy dùng để kiểm tra vô khuẩn phải do cơ quan Kiểm định Quốc gia quy định. Môi trường này phải bảo đảm sự phát triển tốt cho phần lớn các loại vi sinh vật hiếu khí, kị khí thường có trong không khí của cơ sở sản xuất. Để kiểm tra tính vô khuẩn của các sinh phẩm phải dùng môi trường thioglycolat dạng nước. Thành phần của môi trường được mô tả trong phần tiếp theo. Mỗi loại môi trường thioglycolat mới được điều chế phải được kiểm tra về tính. | MÔI TRƯỜNG DÙNG ĐỂ PHÁT HIỆN VI KHUẨN HIẾU KHÍ KỴ KHÍ VÀ NẤM Quy định chung Môi trường nuôi cấy dùng để kiểm tra vô khuẩn phải do cơ quan Kiểm định Quốc gia quy định. Môi trường này phải bảo đảm sự phát triển tốt cho phần lớn các loại vi sinh vật hiếu khí kị khí thường có trong không khí của cơ sở sản xuất. Để kiểm tra tính vô khuẩn của các sinh phẩm phải dùng môi trường thioglycolat dạng nước. Thành phần của môi trường được mô tả trong phần tiếp theo. Mỗi loại môi trường thioglycolat mới được điều chế phải được kiểm tra về tính vô khuẩn khả năng làm cho vi sinh vật phát triển dinh dưỡng và tính trung hoà. Để kiểm tra tính vô khuẩn của các chế phẩm không có chất bảo quản thimerosal môi trường phải được dùng trong vòng 3 tuần lễ kể từ ngày pha chế. Môi trường sau khi sản xuất phải bảo quản ở nhiệt độ phòng và tránh ánh sáng. Để kiểm tra sinh phẩm có chứa thimerosal có thể dùng môi trường thioglycolat pha mới môi trường phải được dùng trong vòng 7 đến 10 ngày kể từ ngày sản xuất. Thời hạn sử dụng cụ thể của môi trường thioglycolat được xác định bằng cách kiểm tra tính chất trung hoà của môi trường sau khi pha chế. Thành phần và cách pha chế môi trường thioglycolat lỏng L - Cystin 0 50 g Natri clorid 2 50 g Glucose C6H12O6 .H2O 5 50 g Thạch agar 0 75 g Chiết xuất men tan trong nước 5 00 g Casein thuỷ phân bằng men tuỵ 15 00 g Nước cất 1000 0 ml Thioglycolat Na 0 50 g Resazurin Na dung dịch 0 01 mới pha 1 00 ml pH cuối cùng 7 0 - 7 2 sau khi hấp ở 121 oC từ 18 - 20 phút Cách pha chế Cho lần lượt 6 thành phần đầu vào cốc. Khuấy trong 1 lít nước nóng cho phần nước còn lại sau đó đun cách thuỷ cốc đựng môi trường chú ý để cho L -Cystin được tan hoàn toàn. Cho thioglycolat natri tiếp đó cho dung dịch natri hydroxyd 1N tính sao để khi hấp pH phải là 7 0 - 7 2. Đun nóng lại không được đun sôi nếu cần lọc qua giấy lọc ướt sau đó cho thêm Resazurin natri. Phân chia vào ống nghiệm thích hợp tuỳ theo yêu cầu. Hấp ở 121 oC trong thời gian từ 18 - 20 phút. Khi lấy từ lò hấp ướt ra
