Có hai phương pháp xác định hàm lượng formaldehyd tồn dư trong vacxin và sinh phẩm: - Phương pháp dựa vào phản ứng tạo chất màu chinol dưới tác dụng của thuốc thử fuchsin và aldehyd hòa tan trong nước. - Định lượng formaldehyd bằng cách so màu của 3,5-diacetyl-1,4-dihydrolutidine ở bước sóng 415 nm. Phức hợp tạo thành có màu vàng chanh do phản ứng của formaldehyd tự do trong mẫu thử với acetylaceton và amoni trong môi trường acid nhẹ. . | XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG FORMALDEHYD TÒN DƯ TRONG VACXIN VÀ SINH PHẢM Nguyên lý Có hai phương pháp xác định hàm lượng formaldehyd tồn dư trong vacxin và sinh phẩm - Phương pháp dựa vào phản ứng tạo chất màu chinol dưới tác dụng của thuốc thử fuchsin và aldehyd hòa tan trong nước. - Định lượng formaldehyd bằng cách so màu của 3 5-diacetyl-1 4-dihydrolutidine ở bước sóng 415 nm. Phức hợp tạo thành có màu vàng chanh do phản ứng của formaldehyd tự do trong mẫu thử với acetylaceton và amoni trong môi trường acid nhẹ. Phương pháp tiến hành Phương pháp 1 Lấy 1 ml mẫu thử cho nước cất vừa đủ 5 ml thêm vào 1ml thuốc thử fuchsin acid trộn đều đậy ống nghiệm bằng nút cao su và đợi 1 giờ. Đo mật độ quang học của dung dịch bằng kính lọc màu tím than bước sóng 400 5 nm . Tiến hành làm song song trên mẫu trắng blank theo trình tự như trên nhưng thay 1 ml mẫu thử bằng 1 ml nước cất. Kết quả xác định được bằng cách so màu của mẫu vacxin thử với dung dịch chuẩn có mật độ quang học gần nhau nhất. Dựng đường chuẩn Lấy 1 ml formaldehyd chuẩn 0 4 cho nước cất vừa đủ 100 ml vào dung dịch 0 004 . Lấy 0 5 ml 1 0 ml 2 0 ml 3 0 ml 4 0 ml 5 0 ml dung dịch chuẩn formaldehyd 0 004 cho vào các ống nghiệm và cho nước cất vừa đủ 5 0 ml thêm 1 0 ml dung dịch thuốc thử. Đợi 1 giờ sau đó tiến hành phân tích như đã mô tả ở trên. Cách pha dung dịch formaldehyd chuẩn 0 4 Trước khi pha tiến hành xác định sơ bộ hàm lượng formaldehyd có trong dung dịch formaldehyd dung dịch phải chứa không ít hơn 37 formaldehyd . Cân 1g dung dịch formaldehyd 40 cân chính xác trong trường hợp dung dịch chứa ít hơn 40 thì phải tính toán lại cho thích hợp cho vào một bình định mức 100ml cho nước cất vừa đủ tới vạch dung dịch 0 4 . Trước khi dùng pha loãng 100 lần. Cách pha thuốc thử fuchsin Hoà tan 2g fuchsin kiềm vào 120ml nước cất đã đun sôi để nguội. Hòa 2g natri sulfit TT vào 20ml nước cất và trộn vào dung dịch trên thêm 2ml acid hydrocloric TT . Cho nước cất vừa đủ 200ml và chờ it nhất 1 giờ mới đem sử dụng. Dung dịch này phải
