Phương pháp 1: Nguyên lý Phương pháp dựa vào phản ứng tạo màu của thuốc thử Folin với phenol Phương pháp tiến hành Vắc xin mẫu thử được ly tâm với vận tốc 3000 vòng/phút trong 15 phút. Bỏ cặn, lấy 1 ml nước cất ở phía trên cho vào bình định mức 100 ml và cho nước cất vừa đủ 100 ml, lắc đều. Lấy 0,5 ml dung dịch trên, thêm 9 ml nước cất, 0,5 ml thuốc thử Folin (TT) pha loãng 2 lần, 2 ml dung dịch natri carbonat 20% (TT). Lắc đều. Đun cách thủy cho sôi. | XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG PHENOL TRONG VẮC XIN VÀ SINH PHẨM Phương pháp 1 Nguyên lý Phương pháp dựa vào phản ứng tạo màu của thuốc thử Folin với phenol Phương pháp tiến hành Vắc xin mẫu thử được ly tâm với vận tốc 3000 vòng phút trong 15 phút. Bỏ cặn lấy 1 ml nước cất ở phía trên cho vào bình định mức 100 ml và cho nước cất vừa đủ 100 ml lắc đều. Lấy 0 5 ml dung dịch trên thêm 9 ml nước cất 0 5 ml thuốc thử Folin TT pha loãng 2 lần 2 ml dung dịch natri carbonat 20 TT . Lắc đều. Đun cách thủy cho sôi trong 1 phút. Làm nguội ở nhiệt độ phòng. Song song tiến hành xây dựng đường chuẩn Cách dựng đường chuân Hút dung dịch phenol chuẩn 1 1000 TT vào các ống nghiệm với lượng như sau 0 1 ml 0 2 ml 0 3 ml 0 4 ml 0 5 ml 0 6 ml 0 7 ml 0 8 ml 0 9 ml 1 0 ml. Thêm vào các ống nghiệm trên mỗi ống một lượng nước cất vừa đủ 9 5 ml 0 5 ml thuốc thử Folin pha loãng 2 lần 2 ml dung dịch natri carbonat 20 TT . Lắc đều. Đun cách thủy cho sôi trong 1 phút. Làm nguội ở nhiệt độ phòng. Song song tiến hành làm mẫu trắng dùng nước cất thay cho mẫu vắc xin thử nghiệm . Đem so màu trên máy quang phổ với bước sóng 310 nm cả với mẫu thử và mẫu chuẩn . Cách tính kết quả a x 2 x 100 x 100 X --------------- Trong đó X Hàm lượng phenol có trong mẫu thử . a x 2 Hàm lượng phenol có trong 1 ml mẫu đã pha loãng tìm được trên đường chuẩn. 100 Độ pha loãng của mẫu thử. 100 Đổi ra Tiêu chuẩn chấp thuận Mỗi loại vắc xin sinh phẩm có tiêu chuẩn khác nhau về hàm lượng phenol dựa vào tiêu chuẩn của WHO hoặc tiêu chuẩn Việt Nam cho vắc xin hay sinh phẩm đó . Hàm lượng phenol trong vắc xin thành phẩm nói chung không được vượt quá 0 12 g lít. Trừ những quy định cụ thể khác. Theo nguyên tắc chung hàm lượng phenol trong vắc xin thành phẩm không được thấp hơn so với hàm lượng cho thấy có khả năng kháng khuẩn và không được cao hơn 115 hàm lượng đăng ký trên nhãn. Pha dung dịch phenol chuẩn Cân chính xác 1g phenol TT hoà tan trong vừa đủ 100 ml nước cất. Trước khi dùng pha loãng 1000 lần bằng nước cất. Pha
