Phép thử nội độc tố vi khuẩn dùng để phát hiện hoặc định lượng nội độc tố của vi khuẩn gram âm có trong mẫu thử cần kiểm tra. Phương pháp sử dụng thuốc thử lysat là dịch phân giải tế bào dạng amip có trong máu một loài sam biển, Limulus polyphemus hoặc Tachypleus tridentatus. Hiện nay có 3 phương pháp để thực hiện phép thử này: phương pháp tạo gel dựa trên sự tạo thành gel khi cho thuốc thử vào dung dịch có chứa nội độc tố; phương pháp đo độ đục, dựa vào sự thay. | PHÉP THỬ NỘI ĐỘC TỐ VI KHUẨN Phép thử nội độc tố vi khuẩn dùng để phát hiện hoặc định lượng nội độc tố của vi khuẩn gram âm có trong mẫu thử cần kiểm tra. Phương pháp sử dụng thuốc thử lysat là dịch phân giải tế bào dạng amip có trong máu một loài sam biển Limulus polyphemus hoặc Tachypleus tridentatus. Hiện nay có 3 phương pháp để thực hiện phép thử này phương pháp tạo gel dựa trên sự tạo thành gel khi cho thuốc thử vào dung dịch có chứa nội độc tố phương pháp đo độ đục dựa vào sự thay đổi độ đục của thuốc thử lysat khi tạo gel phương pháp đo màu dựa trên sự thay đổi màu của phức hợp màu - peptid. Tuỳ theo điều kiện và tính chất của mẫu thử có thể áp dụng một trong các kỹ thuật thích hợp để thực hiện phép thử. Tuy nhiên khi có nghi ngờ hoặc tranh chấp kết luận cuối cùng sẽ dựa vào phương pháp tạo gel trừ khi có chỉ dẫn khác. Phép thử được thực hiện trong điều kiện tránh nhiễm khuẩn. Thiết bị và dụng cụ Tất cả dụng cụ dùng trong phép thử này đều phải không có chứa nội độc tố. Với những dụng cụ thuỷ tinh hoặc bằng chất liệu chịu được nhiệt loại chất gây sốt bằng cách sấy ở 250oC trong ít nhất 30 phút. Nếu dùng các dụng cụ là chất dẻo như các đầu hút của micropipet hay các khay lỗ để làm phản ứng chỉ dùng các loại có chất liệu không ảnh hưởng tới phép thử và không có chứa nội độc tố. Nước để thử nội độc tố nước BET hoặc nước LAL Là nước tinh khiết cho kết quả âm tính trong phép thử nội độc tố ở điều kiện quy định. Có thể dùng nước cất 3 lần hoặc một loại nước tinh khiết thu được bằng phương pháp thích hợp khác đạt yêu cầu trên. Nếu không có chỉ dẫn gì khác dùng nước BET hoặc nước LAL làm dung môi để pha tất cả các dung dịch dùng trong phép thử. Dung dịch acid hydrocloric 0 1M BET và natri hydroxyd 0 1M BET là dung dịch được pha từ acid hydrocloric đậm đặc hoặc natri hydroxid rắn với nước BET trong một dụng cụ không có chứa nội độc tố. Các dung dịch này đạt yêu cầu nếu sau khi điều chỉnh đến pH 6 0- 8 0 cho kết quả âm tính trong điều kiện của phép thử. Chuẩn nội độc .
