PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG

Sắc ký lỏng là phương pháp tách sắc ký các chất dựa trên sự phân bố khác nhau của chúng giữa hai pha không trộn lẫn, trong đó pha động là một chất lỏng chảy qua pha tĩnh chứa trong cột. Sắc ký lỏng được tiến hành chủ yếu dựa trên cơ chế hấp phụ, phân bố khối lượng, trao đổi ion, loại trừ theo kích thước hoặc tương tác hoá học lập thể. Thiết bị Thiết bị bao gồm một hệ thống bơm, bộ phận tiêm mẫu, cột sắc ký (bộ phận điều khiển nhiệt độ có thể. | PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG Sắc ký lỏng là phương pháp tách sắc ký các chất dựa trên sự phân bố khác nhau của chúng giữa hai pha không trộn lẫn trong đó pha động là một chất lỏng chảy qua pha tĩnh chứa trong cột. Sắc ký lỏng được tiến hành chủ yếu dựa trên cơ chế hấp phụ phân bố khối lượng trao đổi ion loại trừ theo kích thước hoặc tương tác hoá học lập thể. Thiết bị Thiết bị bao gồm một hệ thống bơm bộ phận tiêm mẫu cột sắc ký bộ phận điều khiển nhiệt độ có thể được sử dụng nếu cần thiết detector và một hệ thống thu dữ liệu hay một máy tích phân hoặc một máy ghi đồ thị . Pha động được cung cấp từ một hoặc vài bình chứa và chảy qua cột thông thường với tốc độ không đổi và sau đó chạy qua detector. Hệ thống bơm Hệ thống bơm trong sắc ký lỏng phải giữ cho pha động luôn chảy với một lưu lượng không đổi. Những biến đổi áp suất sẽ được giảm thiểu ví dụ cho dung môi chạy qua một thiết bị giảm xung. Ông dẫn và hệ thống nối phải là loại chịu được áp suất sinh ra do hệ thống bơm. Các bơm có thể được lắp với thiết bị loại bỏ bọt khí. Hệ thống điều khiển bằng bộ vi xử lý có khả năng cung cấp pha động hoặc hằng định rửa giải đẳng dòng hoặc thay đổi tỷ lệ thành phần rửa giải gradient theo một chương trình xác định. Trong trường hợp rửa giải gradient hệ thống bơm lấy các dung môi từ một vài bình chứa và các dung môi có thể được trộn lẫn ở áp suất thấp hoặc áp suất cao. Bộ phận tiêm mẫu Dung dịch mẫu thử được đưa vào dòng pha động hoặc vào vị trí gần đầu hoặc đầu cột nhờ một bộ phận tiêm mẫu có khả năng hoạt động ở áp suất cao. Có thể dùng vòng chứa mẫu thử có thể tích cố định hoạc thiết bị có thể tích thay đổi có thể vận hành bằng tay hoặc tự động. Khi tiêm mẫu bằng tay có thể gây ra sai số do thể tích tiêm vào vòng chứa mẫu không đủ Pha tĩnh Có nhiều loại pha tĩnh có thể được sử dụng trong sắc ký lỏng bao gồm - Silica silic dioxyd nhôm oxyd hoặc than hoạt tính dạng xốp thường được dùng trong sắc ký pha thuận mà quá trình phân tách dựa trên sự khác nhau về khả năng hấp phụ hoặc và .