Mở đầu I. Các thiết bị của phòng thí nghiệm nuôi cấy mô và tế bào thực vật (ghi chú: + rất cần, - tùy theo nhu cầu) 1. Phòng rửa và cất nước + Máy cất nước 1 lần (8 L/giờ) + Máy cất nước 2 lần (4 L/giờ) - Máy sản xuất nước khử ion 2. Phòng sấy hấp + Tủ sấy 60-300oC + Nồi khử trùng (autoclave) loại nhỏ (25 L) - Nồi khử trùng loại lớn (50-100 L) 3. Phòng chuẩn bị môi trường + pHmeter + Máy khuấy từ + Cân phân tích 10-4g + Cân. | 150 Bài 1 Mở đầu I. Các thiết bị của phòng thí nghiệm nuôi cấy mô và tế bào thực vật ghi chú rất cần - tùy theo nhu cầu 1. Phòng rửa và cất nước Máy cất nước 1 lần 8 L giờ Máy cất nước 2 lần 4 L giờ - Máy sản xuất nước khử ion 2. Phòng sấy hấp Tủ sấy 60-300oC Nồi khử trùng autoclave loại nhỏ 25 L - Nồi khử trùng loại lớn 50-100 L 3. Phòng chuẩn bị môi trường pHmeter Máy khuấy từ Cân phân tích 10-4g Cân kỹ thuật 10-2g Bếp điện - Micro wave Tủ lạnh 100-200 L - Tủ lạnh sâu -20 -80oC 4. Phòng cấy vô trùng Tủ cấy vô trùng Laminar Clean Bench Quạt thông gió Đèn tử ngoại treo trần hoặc treo tường 1 2 m - Thiết bị lọc không khí 151 5. Phòng ảnh - Máy ảnh kỹ thuật số - Hệ thống đèn chiếu 6. Phòng kính hiển vi Kính hiể n vi 2 mắt độ phóng đại 1000 lần . Kính hiển vi đảo ngược độ phóng đại 1000 lần có gắn máy chụp ảnh kỹ thuật số. Kính lúp 2 mắt độ phóng đại 75 lần . - Microtome và các dụng cụ quan sát tế bào học. - Kính hiển vi huỳnh quang 7. Phòng nuôi Các giàn đèn huỳnh quang nhiều ngăn có độ chiếu sáng ở chỗ để bình nuôi cấy từ 2000-3000 lux. Máy điều hòa nhiệt độ - Máy lắc nằm ngang 100-200 vòng phút Tủ ấm - Nồi phản ứng sinh học bioreactor 8. Phòng sinh hóa Máy sắc ký HPLC sắc ký cột sắc ký lớp mỏng. Thiết bị điện di gel agarose và polyacrylamide Máy chụp ảnh phân tích và lưu trữ hình ảnh của DNA RNA và protein Gene documentation system Máy quang phổ có dải đo từ 190-1100 nm - Một số thiết bị khác để phân tích thành phần sinh hóa của các tế bào và mô nuôi cấy. II. Các nhân tố đảm bảo thành công trong nuôi cấy mô-tế bào thực vật Có 3 nhân tố chính - Bảo đảm điều kiện vô trùng. - Chọn đúng môi trường và chuẩn bị môi trường đúng cách. 152 - Chọn mô cấy xử lý mô cấy thích hợp trước và sau khi cấy. 1. Bảo đảm điều kiện vô trùng . Ý nghĩa của vô trùng trong nuôi cấy mô và tế bào thực vật Môi trường để nuôi cấy mô và tế bào thực vật có chứa đường muối khoáng vitamin. rất thích hợp cho các loại nấm và vi khuẩn phát triển. Do tốc độ phân bào của nấm và vi khuẩn lớn hơn rất .