Chương 4: ENZYME SỬ DỤNG TRONG KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ Tóm tắt: Enzyme là những protein hoạt tính sinh học vả dựa vào loại phản ứng xúc tác mà trong sinh học phân tử có thể chia enzyme thành 6 nhóm khác nhau. Trong đó các nhóm enzyme giới hạn, enzyme polimerase, enzyme nối, các enzyme nuclease được quan tâm nghiên cứu và ứng dụng trong các lĩnh vực của sinh học phân tử và kĩ thuật di truyền. Enzyme được sử dụng trong các kĩ thuật sinh học phân tử như RFLP, PCR, tách dòng phân tử. Nội. | Chương 4 ENZYME SỬ DỤNG TRONG KĨ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ Tóm tắt Enzyme là những protein hoạt tính sinh học vả dựa vào loại phản ứng xúc tác mà trong sinh học phân tử có thể chia enzyme thành 6 nhóm khác nhau. Trong đó các nhóm enzyme giới hạn enzyme polimerase enzyme nối các enzyme nuclease được quan tâm nghiên cứu và ứng dụng trong các lĩnh vực của sinh học phân tử và kĩ thuật di truyền. Enzyme được sử dụng trong các kĩ thuật sinh học phân tử như RFLP PCR tách dòng phân tử. Nội dung của chương gồm 3 vấn đề cơ bản 1 . Enzyme giới hạn 2 . các nhóm enzyme khác 3 . Enzyme nuctease. Hệ thống enzyme có thể chia thành 6 nhóm tuỳ theo loại hình phản ứng mà các enzyme này xúc tác. Nhóm enzyme nuclease có tác dụng cắt và phá huỷ ADN nhóm ADN-ligase có chức năng nối các trình tự ADN lại. nhóm enzyme ADN-polimerase tham gia tổng hợp chuỗi polinucleotit nhóm enzyme ADN-polimerase sửa chữa có chức năng sửa chữa những sai sót trong phân tử ADN nhóm enzyme topoisommerase tác dụng mở xoắn ADN nhóm enzyme phiên mã ngược reverse-transcriptase xúc tác cho quá trình phiên mã ngược từ ARN thành cADN. Các nhóm enzyme trên có vai trò hết sức quan trọng trong các thao tác với ADN và trong công nghệ ADN tái tổ hợp. Trong số đó có các nhóm enzyme giới hạn enzyme sửa chữa ADN ADN-polimease ADN-ligase. 1. ENYME GIỚI HẠN RESTRICTION ENZYME HOẶC ENZYME CẮT HẠN CHẾ RESTRICTION endonuclease - RE . Khái niệm Nhóm enzyme nuclease gồm DN-ase và RN-ase có khả năng bẻ gãy liên kết phosphodiester kết quả là phân huỷ phân tử ADN hoặc ARN. Nhóm enzyme ADN-ase gồm 2 loại Exonuclease enzyme cắt ADN ngoại bào có tác dụng cắt từng cặp nucleotit từ hai đầu của đoạn ADN đi dần vào bên trong hình . Enzyme exonuclease có thể cắt tỉa từng cặp nucleotit ở cả hai mạch cắt kép hoặc cắt từng nucleotit trên một sợi ADN cắt đơn . Endonuclease enzyme cắt ADN nội bào có tác dụng cắt rời ADN tại những vùng xác định gồm vài cặp nucleotit nằm cạnh nhau định vị trong phân tử ADN tạo thành những phân đoạn ADN nhỏ hơn.
