1. Thử nghiệm khả năng chuyển hóa citrate Nguyên tắc: Xác định vi sinh vật có khả năng sử dụng citrat là nguồn hydratcarbon duy nhất. Sản phẩm chuyển hóa làm kiềm hóa môi trường và thay đổi màu của chỉ thị màu o – Cấy vi khuẩn vào môi trường Citrat Simmons, ủ 35 – 37 C/24 h – Phản ứng dương tính: màu xanh nước biển – Phản ứng âm tính: môi trường không đổi màu • E. coli • Enterobacter aerogenes • Dương tính: môi trường đổi màu xanh lá cây sang xanh nước biển • Âm. | Môn Kỹ thuật phân tích Vi sinh - nấm thực phẩm II ATTP 4 MỘT SỐ PHẢN ỨNG SINH HÓA ĐỊNH DANH VI SINH VẬT 1. Thử nghiệm khả năng chuyển hóa citrate Nguyên tắc Xác định vi sinh vật có khả năng sử dụng citrat là nguồn hydratcarbon duy nhất. Sản phẩm chuyển hóa làm kiềm hóa môi trường và thay đổi màu của chỉ thị màu - Cấy vi khuẩn vào môi trường Citrat Simmons ủ 35 - 37oC 24 h - Phản ứng dương tính màu xanh nước biển - Phản ứng âm tính môi trường không đổi màu E. coli Enterobacter aerogenes Dương tính môi trường đổi màu xanh lá cây sang xanh nước biển Âm tính không đổi màu 2. Thử nghiệm Catalase Nguyên tắc Phát hiện men catalase chuyển hóa năng lượng theo phương thức hô hấp với oxy là chất nhận điện tử cuối cùng ở các vi khuẩn hiếu khí và kỵ khí tùy ý - Lấy một ít vi khuẩn vào que cấy và nhúng vào giọt H2O2 . Phản ứng có bọt khí xuất hiện Phản ứng âm tính - không có bọt khí xuất hiện - Không nên sử dụng vi khuẩn cấy trên thạch máu vì dễ dương tính giả 3. Thử nghiệm Oxydase Nguyên tắc Phát hiện khả năng sinh enzym cytochrome c oxidase của vi khuẩn - Pseudomonas aeruginosa _ Neisseria gonorrhoeae và Campylobacter jejuni _ là những vi khuẩn gây bệnh có Oxydase - Lấy một ít chủng vi khuẩn nuôi cấy thuần bôi lên một tờ giấy lọc. Nhỏ thuốc thử N N N N -tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride - Phản ứng dương tính có màu tím. Đọc kết quả trong vòng 10 giây đầu Phản ứng Oxydase sử dụng thuốc thử N N N N -tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride Phản ứng dương tính có màu tím. Phản ứng xuất hiện trong vòng 10 giây đầu. 1 Môn Kỹ thuật phân tích Vi sinh - nấm thực phẩm II ATTP 4 4. Thử nghiệm phân giải Ure Nguyên tắc phát hiện enzym urease phân giải urea _thành ammonia và carbondioxide. Ammonia sinh ra làm kiềm hóa môi trường. - Là phản ứng đặc trưng cho các loài Proteus. - Cấy vi khuẩn vào canh thang Ure. Ủ 37oC 24 - 48 h - Phản ứng dương tính môi trường có màu tím đỏ. Phản ứng âm tính không chuyển màu Dương tính môi trường chuyển thành màu tím Âm tính không màu 5. .
