Sản xuất cây giống sạch mầm bệnh - Cây nhiễm vi khuẩn, nấm, tuyến trùng: chọn cành nhánh không nhiễm đem nuôi cấy - Nhiễm virus, mycoplasma, viroid + Cấy truyền nhiều lần, loại bỏ dòng nhiễm + Xử lý nhiệt độ: 30-37 oC trong 10-14 ngày, 50-60oC thời gian để loại virus + Xử lý hóa chất: thiouracil, xanh malachite | Vi khuẩn E. coli O157:H7: Ñaëc ñieåm chung Thuoäc nhoùm Coliform phaân, hình que, Gram (-), di ñoäng. Kò khí tuyø yù, hieän dieän thường xuyeân trong ñöôøng ruoät ngöôøi vaø gia suùc. Haàu heát caùc doøng khoâng gaây haïi vaø ñoùng vai troø caân baèng sinh hoïc trong sinh lí tieâu hoùa. Moät soá doøng coù khaû naêng gaây ñoäc. TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL CAÙC NHOÙM E. coli GAÂY BEÄNH EPEC (enteropathogenic E. coli) ETEC (enterotoxigenic E. coli) EIEC (enteroinvasive E. coli) EHEC (enterohaemorrhagic E. coli) EAggEC (enteroaggregative E. coli) UPEC (uropathogenic E. coli) TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL E. coli O157:H7 (EHEC) Hiện diện trong ruoät cuûa nhöõng thuù khoeû maïnh. Laàn ñaàu tieân ñöôïc phaân laäp vaø ñònh danh naêm 1982 Thòt coù theå bò nhieãm vi khuaån naøy trong quaù trình gieát moå Caùc nguồn thöïc phẩm khaùc: rau, söõa, nöôùc traùi caây nhieãm phaân gia suùc Lieàu gaây nhieãm thaáp < 10 CFU hay döôùi 200 vi khuaån Khoâng coù khaû naêng leân men ñöôøng D-sorbitol trong 24h Khoâng coù enzyme -D-glucuronidase TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL Laâm saøng Buoàn noân (nausea) Oùi möûa (vomit) Co thaét vuøng buïng (abdominal cramps) Tieâu chaûy (nonbloody diarrhea) Tieâu chaûy ra maùu (bloody diarrhea) Vieâm ruoät keát (haemorrhagic colitis -HC) Trieäu chöùng ureâ huyeát (haemorrhagic uremic syndrome-HUS) Ban xuaát huyeát (thrombotic thrombocytopenic purpura) Töû vong TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL Haemolysin (Hly) Intimin: gen eae (E. coli attaching-effacing) Serine protease (EspP) vaø heä thoáng tieát loaïi II. Shiga-like toxin (Stx): Stx1 vaø Stx2 Stx1 khaùc Stx2 bôûi 3 nu = moät acid amin Stx2: Stx2c, Stx2d, Stx2e, Stx2f Caáu taïo: 1 tieåu phaàn A (active), 5 tieåu phaàn B (binding) Thuï theå: Stx1 vaø Stx2 (Stx2c, Stx2d, Stx2f ): Gb3 (Globotriaosyl ceramide) teá baøo Hela Stx2e: Gb4 (Globotetraosyl ceramide) teá baøo Vero Yeáu toá ñoäc löïc TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL tieåu phaàn A mang hoaït löïc enzym 5 tieåu phaàn B: yeáu toá gaén cuûa ñoäc toá Teá baøo chaát Cô cheá taùc ñoäng cuûa ñoäc toá Stx Thuï theå cuûa teá baøo Ñoäc toá vero bò thöïc baøo, tieåu phaàn hoaït ñoäng (A) ñöôïc giaûi phoùng Caét thaønh phaàn adenine ôû ñaàu muùt 3’ cuûa ribosome 28S Phong toaû söï noái keát cuûa ARNt-aminoacyl EF1 (elongation factor) Öùc cheá quaù trình toång hôïp protein Teá baøo cheát TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL Xeùt nghieäm nhanh vi khuaån E. coli O157:H7 * Loïc 100ml nöôùc coù gaây nhieãm E. coli O157:H7 * Röûa loïc trong 3ml moâi tröôøng BHI * Taêng sinh ôû 37OC trong 4 giôø * Chuaån bò DNA maãu (10 phuùt) * Chaïy PCR (45 phuùt) * ÔÛ noàng ñoä 20 CFU (Colony Formated Unit)/100ml: khoaûng 5 giôø * ÔÛ noàng ñoä 20 CFU (Colony Formated Unit)/100ml: khoaûng 9 giôø TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL Phaùt hieän O157: H7 baèng kyõ thuaät PCR: gien stx2 TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL Chaån ñoaùn E. coli O157:H7 baèng nhuoäm huyønh quang TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL TS. Nguyễn Ngọc Hải - Khoa CNTY - ĐHNL
