Trường Đại Học Nha Trang Môn: Sinh Học Thực Phương Pháp Chuyển Gen Trực. Tiếp Vào Thực Vật. Lớp: 53CNSH. Nhóm: IV. GVHD: Phạm Ngọc Minh Quỳnh Danh sách nhóm:•. Nguyễn Thi Hảo.•. Hoàng Tuấn Lộc.•. Dương Đình Luân.•. Đỗ Thị Cẩm Nguyên.•. Lâm Bích Như.•. Nguyễn Văn Trung Nội dung . Giới . Kĩ thuật chuyển gene trên. thực . Các phương pháp chuyển. gene trực . Một số ứng dụng và thành tựu1. Giới thiệuCó nhiều phương pháp làm biến đổi hệ gene. của sinh vật, nhưng chủ yếu bằng 3 cách:Khái niệm chung.•. Biến nạp gene ở thực vật là quá trình chuyển một. hoặc một số gene ngoại lai vào trong tế bào thực. vật nhằm tạo ra một tính trạng mới mà trước đó cơ. thể thực vật đó không có Mục đích chuyển gene ở thực. . Nghiên cứu và làm sáng tỏ chức năng của một. gene quan tâmq. Làm thay đổi mức độ biểu hiện của một gene nội. bàoq. Chuyển các gene quy định các tính trạng mong. muốn vào TB để thu nhận TB mới và cây chuyển. gene. 2. Kĩ thuật chuyển gene. trên thực vật. Nhờ Agrobacterium Tumefacients. Chuyển gene. gián tiếp. Nhờ virus Bằng súng bắn . VẬT Bằng xung điện Bằng vi tiêm. Chuyển gene. trực tiếp Nhờ kỹ thuật siêu âm Bằng hóa chất Qua ống phấn. 3. Các phương pháp chuyển. gene trực tiếp Súng bắn gen Xung điện phấn tiếp Hóa chất. Siêu âm Vi tiêm Chuyển gene bằng súng bắn gene. Súng bắn gen () là một sử dụng để tin di truyền bào, được thiết tiên cho biến ngoại lai bào thực vật. Nguyên lý chung của phương pháp này là áp lực của xung khí helium để đẩy các có kích thước nhỏ mang các gene mong muốn.(các viên đạn này thường được làm bằng Au,.Tungsten, titanium hoặc volfram), xuyên qua các bào, mô để xâm nhập vào genome thực điểm:.-. Có thể chuyển gene vào nhiều loại tế bào và mô-. Bắn một lần được nhiều tế bào-. Quá trình chuyển gen nhanh, thao tác đơn giản-. Các vector mang gene tái tổ hợp đơn giản và chỉ. cần một lượng vector nhỏNhược điểm:.•. Đòi hỏi thiết bị đắt tiền (không phải phòng thí. nghiệm nào cũng có thể đầu tư)•. Có thể gây ra sự xáo trộn trật tự của đối tượng. chuyển gen•. Tần số biến nạp ổn định thấp Chuyển gene bằng xung niệm:.Ø. Là phương pháp sử dụng xung điện. trong thời gian ngắn để tạo ra các lỗ trên. màng tế bào trần làm cho DNA bên ngoài. môi trường có thể xâm nhập vào bên. trong tế trình:. Tạo dung dịch tế bào huyền phùTạo xung điện với hiệu điện thế cao, trong thời gian ngắn Protoplast bị thủng một số chỗ DNA thâm nhập, gắn vào hệ gene thực vật Nuôi cấy protoplast trong môi trường chọn lọc Nuôi cấy invitro, tái sinh cây Chọn lọc cây chuyển điểm. – Phương pháp này có thể thực hiện với các. mô in vivo còn nguyên vẹn – Ðoạn DNA ngoại lai được biến nạp có kích. thước lớn•. Nhược điểm:.•. Tỷ lệ các tế bào được chuyển gene còn thấp. Chuyển gene trực tiếp nhờ hóa. chất. Là phương gene (tế ) nhờ các học glycol.(PEG) hoặc tắc•. Khi có sự tác động của hóa chất thì. màng của protoplast bị thay đổi và. protoplast có thể thu nhận DNA ngoại lai. vào bên trong tế bào•. Ở nồng độ cao, PEG làm ADN cần biến. nạp không còn ở trạng thái hoà tan. nữa
