Chúng tôi đã thử nghiệm chuyển gen thành công với 2 gen bằng Agrobacterium tumefaciens và bắn gen hồ điệp dựa trên nguồn vật liệu ban đầu là PLBs được MT lỏng tĩnh. | Trường ĐH VĂN LANG Khoa CNSH Lớp K14s1 Bài thuyết trình: Thành viên: Trương Thị Thu Hiền Nguyễn Thị Kim Phụng Phan Thị Như Mai Nguyễn Xuân Lam Phan Thị Mỹ Linh Phạm Thị Thanh Liêm Nguyễn Thi Mai Hoa Thử nghiệm chuyển gen trên Lan Hồ Điệp * Tóm tắt Giới thiệu vấn đề Vật liệu và phương pháp Biện luận kết quả Kết luận THỬ NGHIỆM CHUYỂN GEN TRÊN LAN HỒ ĐIỆP (PHALAENOPSIS AMABILIS L.) BẰNG PHƯƠNG PHÁP BẮN GEN VÀ AGROBACTERIUM TUMEFACIENS Tác giả : Trần Lê Lưu Ly, Nguyễn Hữu Hoàng, Bùi Lan Anh, Trần Nguyên Vũ, Bùi Văn Lệ (Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên-HCM) Tóm tắt Chúng tôi đã thử nghiệm chuyển gen thành công với 2 PP chuyển gen bằng Agrobacterium tumefaciens và bắn gen trên lan hồ điệp dựa trên nguồn vật liệu ban đầu là PLBs được nuôi trên MT lỏng tĩnh. Với TN chuyển gen gián tiếp, chủng A. tumefaciens C58pGV2260 mang plasmid p35SGUS- INT chứa gen uidA và nptII được sử dụng và thu được kết quả biểu hiện GUS tối ưu ở nồng độ acetosyringone 50 µM sau 4 ngày đồng nuôi cấy. Đối với PP | Trường ĐH VĂN LANG Khoa CNSH Lớp K14s1 Bài thuyết trình: Thành viên: Trương Thị Thu Hiền Nguyễn Thị Kim Phụng Phan Thị Như Mai Nguyễn Xuân Lam Phan Thị Mỹ Linh Phạm Thị Thanh Liêm Nguyễn Thi Mai Hoa Thử nghiệm chuyển gen trên Lan Hồ Điệp * Tóm tắt Giới thiệu vấn đề Vật liệu và phương pháp Biện luận kết quả Kết luận THỬ NGHIỆM CHUYỂN GEN TRÊN LAN HỒ ĐIỆP (PHALAENOPSIS AMABILIS L.) BẰNG PHƯƠNG PHÁP BẮN GEN VÀ AGROBACTERIUM TUMEFACIENS Tác giả : Trần Lê Lưu Ly, Nguyễn Hữu Hoàng, Bùi Lan Anh, Trần Nguyên Vũ, Bùi Văn Lệ (Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên-HCM) Tóm tắt Chúng tôi đã thử nghiệm chuyển gen thành công với 2 PP chuyển gen bằng Agrobacterium tumefaciens và bắn gen trên lan hồ điệp dựa trên nguồn vật liệu ban đầu là PLBs được nuôi trên MT lỏng tĩnh. Với TN chuyển gen gián tiếp, chủng A. tumefaciens C58pGV2260 mang plasmid p35SGUS- INT chứa gen uidA và nptII được sử dụng và thu được kết quả biểu hiện GUS tối ưu ở nồng độ acetosyringone 50 µM sau 4 ngày đồng nuôi cấy. Đối với PP chuyển gen trực tiếp, chúng tôi sử dụng hệ thống máy bắn gen BiolisticTM PDS-1000/He để biến nạp plasmid pBAR-GUS (chứa gen uidA và bar). KQ cho thấy, tỉ lệ biểu hiện GUS cao nhất được ghi nhận ở khoảng cách bắn 6 cm, nồng độ tungsten/DNA plasmid là 500 μg/0,5 μg. 1. Giới thiệu Lan Hồ Điệp - Với mục tiêu bước đầu thử nghiệm quy trình, chúng tôi tiến hành biến nạp plasmid p35SGUS-INT và pBAR-GUS vào Lan Hồ Điệp bằng PP gián tiếp nhờ VK Agrobacterium tumefaciens và PP trực tiếp bằng súng bắn gen nhằm tạo tiền đề cho các nghiên cứu chuyển gen mục tiêu về sau. 2. Vật liệu và phương pháp Vật liệu . Vật liệu cấy và MT nuôi cấy : PLB (Protocorm Like Body) có nguồn gốc từ lá của giống Lan Hồ Điệp được nuôi trên môi trường HY bổ sung 30 g/l glucose, NAA 0,5 mg/l và BAP 2 mg/l bằng PP lỏng tĩnh trong 2 tháng. Lát mỏng (1 – 2 mm) của các PLB này được sử dụng làm mẫu cấy trong tất các thí nghiệm chuyển gen. Môi trường HY : dịch chiết nấm men 7g N-Z amine 3g Manitol 10g Dịch chiết bắp 4g .
