Urease là một loại enzym thuỷ phân ure hình thành NH3 và CO2, được ứng dụng rất nhiều trong Y học và Công nghiệp thực phẩm để định lượng ure trong các mẫu bệnh phẩm và nước chấm. Trên thế giới, có rất nhiều nhà khoa học nghiên cứu về enzym urease và và các đặc tính của chúng, tuy nhiên các bài nghiên cứu về urease từ các nguồn nguyên liệu đậu khác nhau cho các kết quả khác nhau về đặc tính urease | XÁC ĐỊNH PHÂN TỬ LƯỢNG VÀ CÁC THÔNG SỐ ĐỘNG HỌC CỦA UREASE TỪ ĐẬU NÀNH HẠT VÀNG VIỆT NAM Lê Thị Phú Nguyễn Thị Cẩm Vi Trường Đại học Bán công Tôn Đức Thắng 1. MỞ ĐẦU Urease là một loại enzym thuỷ phân ure hình thành NH3 và CO2 được ứng dụng rất nhiều trong Y học và Công nghiệp thực phẩm để định lượng ure trong các mẫu bệnh phẩm và nước chấm. Trên thế giới có rất nhiều nhà khoa học nghiên cứu về enzym urease và và các đặc tính của chúng tuy nhiên các bài nghiên cứu về urease từ các nguồn nguyên liệu đậu khác nhau cho các kết quả khác nhau về đặc tính urease. Điều này chứng tỏ urease từ các nguyên liệu đậu khác nhau có thể có một số khác biệt về tính chất. Còn ở Việt Nam chỉ mới có các nghiên cứu để tinh sạch urease hoàn toàn chưa có tác giả nào nghiên cứu nào về các đặc tính urease từ nguyên liệu đậu nành Việt Nam. Để có thể ứng dụng urease trong Y học và Thực Phẩm hiệu quả rất cần thiết phải nắm được các đặc tính nước ta hiện nay vẫn phải nhập chế phẩm urease và kit urease từ nước ngoài với giá thành rất cao. Do đó chúng tôi thực hiện đề tài này nhằm tìm ra một số đặc tính urease đậu nành hạt vàng Việt Nam phân tử lượng của urease và chuỗi tiểu đơn vị các thông số động học của urease. 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu Urease đậu nành hạt vàng Việt Nam được tinh sạch qua các công đoạn trích ly với dệm phosphate pH 7 1 15M chứa 0 05M EDTA và 0 05M L-cystein tủa phân đoạn sunfat amon 65 và 55 bão hòa trao đổi ion trên DEAE - cellulose đông khô bảo quản dưới dạng bột trắng mịn. Hoá chất dãy protein chuẩn 10 000 - 250 000 Da và 35 000 - 400 000 Da Nessler Merck Glycine Tris base EDTA Acrylamide và bisacrylamide SDS TEMED Amonium persulfate DEAE - Cellulose Merck . Phương pháp nghiên cứu Phương pháp Nessler xác định hoạt tính urease 4 Phương pháp điện di điện di trên gel 7 5 và 10 polyacrylamid với tốc độ dòng 20mA gel được nhuộm với Coomassie Blue R-250. 1 Xác định phân tử lượng của urease lập đồ thị đường chuẩn biểu .
