Tham khảo tài liệu 'hộp điện trong công nghệ dna part 8', kỹ thuật - công nghệ, điện - điện tử phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Đánh dấu đầu tận cùng của các phân tử DNA mang đầu lồi 3 tương tự như ứng dụng của đoạn Klenow. Đánh dấu các đoạn DNA để làm mẫu dò. Biến đổi đầu sole của DNA sợi đôi thành đầu bằng. . Taq DNA polymerase Thermus aquaticus Taq DNA polymerase Taq pol là một loại DNA polymerase chịu nhiệt M Da của vi khuẩn Thermus aquaticus. Enzyme này được dùng để kiểm tra sự có mặt hoặc không của một gen bằng cách xúc tác cho sự tổng hợp gen đó ở điều kiện in vitro nhờ phản ứng chuỗi polymerase PCR xem chương 3 . Taq pol thay thế cho DNA polymerase I của E. coli do có khả năng chịu nhiệt cao phù hợp với điều kiện phản ứng của PCR và nó có thể tổng hợp một sợi DNA dài 1 kb trong vòng 30 giây ở 72oC. - Một trong những hạn chế của Taq pol là sự chính xác không cao trong quá trình sao chép của nó do bị mất cơ chế đọc sửa hoạt tính exonuclease 3 ũ5 . Enzyme Taq pol thương mại có tỷ lệ sao chép lỗi 1 nucleotide và có thể tạo ra 16 sản phẩm PCR dài 1 kb bị đột biến trong phản ứng khuếch đại. Mặc dù có nhược điểm trên Taq pol vẫn có thể được dùng trong các thí nghiệm đòi hỏi một trình tự di truyền chính xác như trong tạo dòng phân tử . Tuy nhiên kết quả cho ra một vector mang đoạn chèn sản phẩm PCR cần phải được kiểm tra bằng sequencing. - Ưu điểm của Taq pol là sản xuất các đoạn gen mang hai đầu lồi A. Điều này đặc biệt hữu ích trong TA cloning là kỹ thuật mà vector plasmid được sử dụng đã có sẵn hai đầu lồi T bổ sung với hai đầu lồi A của sản phẩm PCR nhờ đó đã làm tăng hiệu quả của phản ứng gắn. Hoạt tính Phàn ứng Cơ chất 6 -s 3 DMA polymerase snzyiT e DMAch nclNTP - CNA- jdN - nPP Mg3- Khuôn mầu sặ đoan moi cNA mang đầu 3-OH Ngoài Taq pol nhiều DNA polymerase chịu nhiệt khác đã được đưa ra thị trường với các chức năng chuyên biệt hay hoàn thiện hơn. Chẳng hạn Pfu DNA polymerase Pfu pol được tách chiết từ Pyrococcus furiosus thường được dùng thay cho hoặc kết hợp với Taq pol. Enzyme này ổn nhiệt hơn và có khả năng đọc sửa vì thế cho tỷ lệ sao chép lỗi thấp. Hoặc
