Bài viết Các nhân tố ảnh hưởng đến hiệu quả chuyển gen qua vi khuẩn Agrobacterium ở lúa (Oryza sativa L.) sử dụng hệ thống chọn lọc phosphomannose-isomerase trình bày trong nghiên cứu này, các yếu tố bao gồm xử lý mô sẹo, chế độ ánh sáng trong thời gian đồng nuôi cấy và sử dụng mannose như là tác nhân chọn lọc trong môi trường tái sinh được khảo sát về sự chuyển gen ở giống lúa Taipei 309,. . | Tạp chı́ Khoa học Trường Đại học Cầ n Thơ Tập 49, Phần B (2017): 9-17 DOI: CÁC NHÂN TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN HIỆU QUẢ CHUYỂN GEN QUA VI KHUẨN Agrobacterium Ở LÚA (Oryza sativa L.) SỬ DỤNG HỆ THỐNG CHỌN LỌC PHOSPHOMANNOSE-ISOMERASE Trần Thị Xuân Mai và Nguyễn Thị Liên Viện Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Cần Thơ Thông tin chung: Ngày nhận: 09/11/2016 Ngày chấp nhận: 29/04/2017 Title: Factors affecting the efficiency of Agrobacteriummediated transformation in rice (Oryza sativa L.) using phosphomannose isomerase selection system Từ khóa: Agrobacterium tumefaciens, Chọn lọc tích cực, Chuyển gen, Giống lúa Taipei 309, Phosphomannose-isomerase Keywords: Agrobacterium tumefaciens, phosphomannose-isomerase, positive selection, Taipei 309, transformation ABSTRACT In this study, several factors including callus treatment, light regimes during co-cultivation period and using mannose as the selective agent in regeneration medium were investigated for the transformation in japonica rice variety Taipei 309. Proliferated calli derived from the embryo scutella were inoculated with Agrobacterium tumefaciens carrying the vector containing a gene encoding phosphomannose isomerase (PMI). Only transformed cells were capable of utilizing mannose as a carbon source and callus induction frequency on selection medium RO5 was used to evaluate the gene transfer efficiency. The results indicated that the increase of gene transfer efficiency in wounded calli () as compared to intact calli (). In co-cultivation period, the best result was obtained () when callus was cocultured under continuous light regime. Shoot regeneration from transformed calli was 100% and in medium RO6 and medium RO6 + 2% mannose, respectively. Similarity, the shoot proliferation rate was and in medium RO7 and medium RO7 + mannose, respectively. A chlorophenol red (CPR) assay was used to confirm the activity of PMI gene, 100% of .
