Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Tài liệu: Enzyme giới hạn

Enzyme giới hạn (restriction enzyme, RE) là một enzyme endonuclease có vị trí nhận biết điểm cắt DNA đặc hiệu. Những enzyme này phân huỷ liên kết phosphodieste của bộ khung DNA mạch đôi mà không gây tổn hại đến bases. | Enzyme giới hạn Enzyme giới hạn restriction enzyme RE là một enzyme endonuclease có vị trí nhận biêt 4- Ầ FAX T A 4- 1 ATI A điêm căt DNA đặc hiệu. Những enzyme này 1 A 1 7 1 A 1 Ấ. 1 1 1 9 1 A 1 1 phân huỷ liên kêt phosphodieste của bộ khung ĨA TA 1 4- A 11 V J Ả 1 4- Ấ 1 DNA mạch đôi mà không gây tôn hại đên bases. r 1 V 1 Ấ. 1 r 1 A 1 A L. r Các liên kêt hóa học mà bị enzyme này căt có A 1 Ẳ 4- . . Ấ J 7 . 1 1 Ò 1 1 1 r 1 A thê được nôi trở lại băng loại enzyme khác là các ligases vì thê các phân đoạn giới hạn sản 1 Ẳ 9 19 r L J TA TA Al w J J A . r phâm của phản ứng căt RE mà bị căt từ các nhiễm sắc thể hoặc gene khác nhau có thể được ghép cùng nhau nếu có trình tự đầu dính bổ sung với nhau xem chi tiết phía dưới . Nhiều kỹ thuật sinh học phân tử và kỹ thuât di truyền đều dựa vào các enzyme giới hạn. Thuật ngữ giới hạn xuất phát từ việc các enzyme này được khám phá từ các chủng E. coli mà đang hạn chế sự phát triển của các 2thực khuẩn thể . Vì thế enzyme giới hạn được cho là cơ chế của vi khuẩn nhằm ngăn chặn sự tấn công của virus v à giúp loại bỏ các trình tự của virus. Mục lục . 1 Phân loại enzyme giới hạn . 2 Vì trí điểm cắt . 3 Đoạn bổ sung và đoạn nối . 4 Cách sử dụng . 5 Nhiều trình tự nhận biết là palindromic . 6 Tên gọi . 7 Thí dụ minh hoạ . 8 Liên kết ngoài Phân loại enzyme giới hạn Các nhà sinh hóa chia enzyme cắt giới hạn nói chung thành 3 loại gọi là Loại I Loại II và Loại III. Đối với hai loại I và III cả hoạt tính phân giải acid nucleic hay phân giải nhóm methyl đều thực hiện chung bởi một phức hợp enzyme lớn. Mặc dù những enzyme thuộc 2 loại này cũng nhận biết những trình tự DNA đặc hiệu vị trí cắt thường cách xa vị trí nhận biết có khi đến cả trăm base. Chúng cũng cần ATP để hoạt động. Những enzyme này bắt đầu bằng việc kiểm tra tình trạng methyl hóa của 2 adenine trong vùng nhận biết. Nếu cả hai adenine đều không được methyl hóa dấu hiện cho thấy đây là DNA ngoại lai phức hợp enzyme thay đổi cấu hình và thực hiện hoạt tính phân giải. Tuy nhiên