Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Tinh sạch và đánh giá khả năng thủy phân arabinoxylan của xylanase tự nhiên và tái tổ hợp

Hệ enzyme thủy phân arabinoxylan rất phong phú và đa dạng, trong đó là endo-1,4-β-xylanase là nhóm enzyme quan trọng nhất, tác động ngẫu nhiên vào mạch chính của khung xylan và giải phóng ra các arabinoxylan oligosacaride như các loại đường D-xylose, xylobiose, L-arabinose, xylotetraose, xylopentose. Nhóm enzyme này dễ dàng được sản xuất từ các chủng vi sinh vật tự nhiên như vi khuẩn, nấm men, nấm sợi và cũng được nghiên cứu sử dụng công nghệ tái tổ hợp để chuyển gene vào các vật chủ thích hợp nhằm chủ động về chủng giống. | Tạp chí Công nghệ Sinh học 19 4 741-748 2021 TINH SẠCH VÀ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG THỦY PHÂN ARABINOXYLAN CỦA XYLANASE TỰ NHIÊN VÀ TÁI TỔ HỢP Đỗ Thị Tuyên1 2 Nguyễn Thu Ngân3 Đào Thị Mai Anh3 Nguyễn Thị Hồng Nhung1 1 Viện Công nghệ sinh học Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 2 Học viện Khoa học và Công nghệ Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 3 Trường Đại học Dược Hà Nội Người chịu trách nhiệm liên lạc. E-mail dttuyen@ibt.ac.vn Ngày nhận bài 06.7.2020 Ngày nhận đăng 23.9.2020 TÓM TẮT Hệ enzyme thủy phân arabinoxylan rất phong phú và đa dạng trong đó là endo-1 4-β-xylanase là nhóm enzyme quan trọng nhất tác động ngẫu nhiên vào mạch chính của khung xylan và giải phóng ra các arabinoxylan oligosacaride như các loại đường D-xylose xylobiose L-arabinose xylotetraose xylopentose. Nhóm enzyme này dễ dàng được sản xuất từ các chủng vi sinh vật tự nhiên như vi khuẩn nấm men nấm sợi và cũng được nghiên cứu sử dụng công nghệ tái tổ hợp để chuyển gene vào các vật chủ thích hợp nhằm chủ động về chủng giống. Trong bài báo này chúng tôi tiến hành tinh sạch xylanase tự nhiên và tái tổ hợp để so sánh sự khác nhau về sản phẩm thủy phân giữa enzyme tự nhiên và tái tổ hợp. Qua hai bước tinh sạch bằng cột sắc ký lọc gel sephadex G-100 và cột sắc ký trao đổi ion DEAE-sephadex chúng tôi đã đã tinh sạch được xylanase tự nhiên từ chủng Aspergillus niger DSM1957 có khối lượng phân tử khoảng 25 kDa hoạt tính riêng đạt 3240 IU mg độ sạch tăng so với enzyme thô ban đầu là 1 68 lần với hiệu suất thu hồi 36 . Xylanase tái tổ hợp từ chủng Pichia pastoris GS115 pPXlnA được tinh sạch qua cột sắc kí ái lực ProbondTM có khối lượng phân tử khoảng 36 kDa hoạt tính riêng đạt 423 11 IU mg protein độ sạch tăng so với enzyme thô ban đầu là 3 2 lần với hiệu suất thu hồi 21 1 . Xylanase tự nhiên thương mại có khả năng thủy phân ra đường L- arabinose tốt hơn enzyme tự nhiên và tái tổ hợp. Xylanase tự nhiên thủy phân arabinoxylan hãng Megazyme ra đường L- arabinose trong đệm sodium acetate 50 mM pH