Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Các phương pháp chẩn đoán bệnh cúm gia cầm

Lấy mẫu ổ nhớp: Dịch ở nhớp được lấy bằng tăm bông tại lỗ huyệt , sau đó được đặt vào trong ống nhựa đã khử trùng chứa 12 ml dung dịch bảo quản có kháng sinh liều cao để hạn chế sự phát triển của vi khuẩn . Mẫu được giữ ở 40C và phải tiến hành phân lập virus trong phạm vi 48 giờ kể từ khi lấy mẫu , nếu cần bảo quản trong thời gian dài hơn thì phải giữ ở nhiệt độ 700 C. | Các phương pháp chẩn đoán bệnh cúm gia cầm Chẩn đoán huyết thanh học Phản ứng ngưng kết hồng cầu gà (HA) Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu gà(HI) Chẩn đoán virus học Phưong pháp phân lập virus trên phôi trứng Giám định virus bằng kỹ thuật PCR Chẩn đoán virus học Lấy mẫu và bảo quản bệnh phẩm Lấy mẫu ổ nhớp: Dịch ở nhớp được lấy bằng tăm bông tại lỗ huyệt , sau đó được đặt vào trong ống nhựa đã khử trùng chứa 1-2 ml dung dịch bảo quản có kháng sinh liều cao để hạn chế sự phát triển của vi khuẩn . Mẫu được giữ ở 40C và phải tiến hành phân lập virus trong phạm vi 48 giờ kể từ khi lấy mẫu , nếu cần bảo quản trong thời gian dài hơn thì phải giữ ở nhiệt độ -700 C Lấy mẫu và bảo quản bệnh phẩm Mẫu bệnh phẩm được pha trong PBS(pH 7,2) thành huyễn dịch 10% Ly tâm huyễn dịch 1000vòng/phút thu dịch nổi Bổ sung kháng sinh 10 X (đặc 10 lần) gồm Kanamycin, Penicilin, Steptomycin theo tỷ lệ 1/10 vào huyễn dịch bệnh phẩm trên, để trong tủ lạnh 40 C ít nhất trong vòng 2 giờ để kháng sinh tác dụng. Các huyễn dịch bệnh phẩm nếu không được xử lý kháng sinh thì có thể lọc qua màng lọc 0,45μm hoặc 0,22μm. Phân lập virus trên phôi gà Phân lập virus từ bệnh phẩm bằng cách tiêm vào túi niệu phôi gà 9-11 ngày tuổi Tiêm truyền trên phôi gà Đặt trứng lên khay, xoay buồng hơi lên phía trên Sát trùng vỏ trứng và đục một lỗ trên buồng hơi Dùng syringen tiêm truyền bệnh phẩm theo lỗ đã đục vào túi niệu lượng 0,1-0,2 ml huyễn dịch/trứng . Mỗi bệnh phẩm tiêm 3 trứng. Gắn lỗ tiêm bằng keo gắn vỏ trứng hoặc parafin Phân lập virus trên phôi gà Ấp trứng ở 370 C trong 7 ngày Thu hoạch nước trứng Cất trứng vào tủ lạnh 40 C trong 4 giờ hoặc để trong tủ ấm -200 C trong 30 phút . Dùng panh kẹp hoặc kéo đầu nhọn mở nắp trứng ở phía buồng hơi Hút nước niệu mô bâừng pipet, cho vào ống nghiệm 10ml. Bảo quản nước trứng đã thu hoặch được trong tủ ấm -700 C Mẫu đã phân lập được kiểm tra bằng phản ứng HA. Nếu âm tính có thể cấy chuyển trên phôi gà thêm 2-3 lần Phản ứng RT-PCR Bước1: chiết tách RAN từ bệnh phẩm . | Các phương pháp chẩn đoán bệnh cúm gia cầm Chẩn đoán huyết thanh học Phản ứng ngưng kết hồng cầu gà (HA) Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu gà(HI) Chẩn đoán virus học Phưong pháp phân lập virus trên phôi trứng Giám định virus bằng kỹ thuật PCR Chẩn đoán virus học Lấy mẫu và bảo quản bệnh phẩm Lấy mẫu ổ nhớp: Dịch ở nhớp được lấy bằng tăm bông tại lỗ huyệt , sau đó được đặt vào trong ống nhựa đã khử trùng chứa 1-2 ml dung dịch bảo quản có kháng sinh liều cao để hạn chế sự phát triển của vi khuẩn . Mẫu được giữ ở 40C và phải tiến hành phân lập virus trong phạm vi 48 giờ kể từ khi lấy mẫu , nếu cần bảo quản trong thời gian dài hơn thì phải giữ ở nhiệt độ -700 C Lấy mẫu và bảo quản bệnh phẩm Mẫu bệnh phẩm được pha trong PBS(pH 7,2) thành huyễn dịch 10% Ly tâm huyễn dịch 1000vòng/phút thu dịch nổi Bổ sung kháng sinh 10 X (đặc 10 lần) gồm Kanamycin, Penicilin, Steptomycin theo tỷ lệ 1/10 vào huyễn dịch bệnh phẩm trên, để trong tủ lạnh 40 C ít nhất trong vòng 2 giờ để kháng sinh tác dụng.