Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Luận văn: PHÁT HIỆN BỆNH KHẢM LÁ MÍA BẰNG KỸ THUẬT ELISA VÀ BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU PHÁT HIỆN BỆNH CẰN MÍA GỐC BẰNG KỸ THUẬT PCR (part 3)

Hình 4.2. Vi khuẩn Lxx dưới kính hiển vi (độ phóng đại 1000 lần). Kết quả quan sát sự xuất hiện của vi khuẩn Lxx trong dịch chiết nước mía dưới kính hiển vi cho kết quả: trong 6 giống mía sản xuất được khảo sát tại TTNNCMĐ thì chỉ có giống VN84-1437 và R570 là không nhiễm bệnh, còn lại 4 giống mía khác là C90-127, DLM24, VN85-1427 và ROC26 đều thấy đƣợc sự xuất hiện của vi khuẩn Lxx dưới kính hiển vi (xem Bảng 4.1). Tuy nhiên, phương pháp chẩn đoán này cho tỉ lệ kết quả. | 33 Hình 4.2. Vi khuẩn Lxx dưới kính hiển vi độ phóng đại 1000 lần . Kết quả quan sát sự xuất hiện của vi khuẩn Lxx trong dịch chiết nước mía dưới kính hiển vi cho kết quả trong 6 giống mía sản xuất được khảo sát tại TTNNCMĐ thì chỉ có giống VN84-1437 và R570 là không nhiễm bệnh còn lại 4 giống mía khác là C90-127 DLM24 VN85-1427 và ROC26 đều thấy được sự xuất hiện của vi khuẩn Lxx dưới kính hiển vi xem Bảng 4.1 . Tuy nhiên phương pháp chẩn đoán này cho tỉ lệ kết quả dương tính giả và âm tính giả khá cao. Nguyên nhân ở đây là sự phát hiện vi khuẩn Lxx trong dịch chiết dưới kính hiển vi ở độ phóng đại 1000 lần là rất khó khi nồng độ vi khuẩn nhiễm bệnh hiện diện trong dịch chiết thấp. Bảng 4.1. Kết quả chẩn đoán bệnh cằn mía gốc trên các giống sản xuất tại TTNCMĐ và nông trường Thọ Vực bằng phương pháp quan sát dưới kính hiển vi. TTNCMĐ Nông trường Thọ Vực STT Giống Kết quả STT Giống Kết quả 1 C90-127 1 Mi55-14 2 VN84-4137 - 2 VN84-4137 - 3 4 DLM24 R570 3 QĐ368 - 4 VĐ85-177 5 VN85-1427 5 VN85-1427 6 ROC26 Chú thích - Mầu âm tính Mầu dương tính. Thân mía được nhuộm bằng dung dịch thuốc nhuộm safranin sau 30 phút làm tiêu bản xem dưới kính hiển vi với độ phóng đại 40 và 100 lần ta sẽ thấy có sự nhuộm màu 34 hay không nhuộm màu của các bó mạch khoẻ mạnh và bị nhiễm Lxx. xem hình 4.3 . Mạch đuợc nhuộm màu đỏ của safranin là kết quả của sự thẩm thấu dung dịch thuốc nhuộm lên trên thân còn mạch không đuợc nhuộm màu là do vi khuẩn Lxx tồn tại trong bó mạch làm tắt nghẽn sự luu thông của dung dịch thuốc nhuộm đi lên lên trên. Hình 4.3. Mẫu thân nhuộm safranin duới kính hiển vi x 40 lần A và x 100 lần B . Chú thích a mạch vàng có chứa vi khuẩn b mạch đỏ là không có vi khuẩn. Chẩn đoán bằng phuơng pháp nhuộm STM cho kết quả tất cả các giống mía sản xuất khảo sát tại TTNCMĐ và nông truờng Thọ Vực đều bị nhiễm bệnh cằn mía gốc với các mức độ nhiễm bệnh khác nhau. xem bảng 4.2 . Bảng 4.2. Kết quả chẩn đoán bệnh cằn mía gốc dựa trên phuơng pháp nhuộm STM. TTNCMĐ Nông trường Thọ .