Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Nghiên cứu tạo kháng thể đa dòng và bước đầu ứng dụng phát hiện helicobacter pylori trong mẫu huyết thanh và nước bọt

Bài viết được tiến hành nhằm tạo ra kháng thể đặc hiệu phát hiện nhanh H. pylori mang cagA và bước đầu sử dụng kháng thể tạo ra phát hiện H. pylori trong mẫu huyết thanh và nước bọt. . | TẠP CHÍ SINH HỌC 2014, 36(1se): 42-46 NGHIÊN CỨU TẠO KHÁNG THỂ ĐA DÒNG VÀ BƯỚC ĐẦU ỨNG DỤNG PHÁT HIỆN Helicobacter pylori TRONG MẪU HUYẾT THANH VÀ NƯỚC BỌT Diệp Thế Tài1*, Đỗ Hồng Phước1, Lê Thị Tuyết Nga2, Nguyễn Thị Phương Lan1, Trần Ánh Tuyết3 1 Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh, *taithediep@gmail.com Phòng khám đa khoa An Khang, Tổng công ty Sữa Việt Nam-Vinamilk 3 Phòng khám quốc tế Yersin, công ty Đầu tư 3H 2 TÓM TẮT: Theo thống kê ở Việt Nam, mỗi năm có khoảng 15.000-20.000 người bị ung thư dạ dày, nguyên nhân gây bệnh chủ yếu do vi khuẩn Helicobacter pylori. Cơ quan nghiên cứu ung thư quốc tế (IARC) xếp vi khuẩn này vào nhóm I các tác nhân gây ung thư ở người dựa trên hai độc tố chính là VacA và CagA, trong đó, CagA (Cytotoxin-associated gene A) là một protein gây đáp ứng miễn dịch cao được mã hóa từ gen cagA, hiện diện trong khoảng 50-70% các chủng H. pylori, chiếm tỷ lệ rất cao trong ung thư dạ dày. Phát hiện nhanh chủng H. pylori mang cagA sẽ góp phần cảnh báo và định hướng điều trị. Vì vậy, nghiên cứu này được thực hiện nhằm mục đích tạo ra kháng thể đa dòng phát hiện nhanh chủng H. pylori mang cagA. Để tạo kháng thể, protein CagA được sử dụng như kháng nguyên tiêm vào chuột nhắt cái màu trắng (Swiss), 6-8 tuần tuổi. Đáp ứng kháng thể được kiểm tra bằng phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch (Ouchterlony) và phương pháp ELISA gián tiếp. Giới hạn phát hiện và hiệu giá kháng thể được xác định bằng cách pha loãng bậc 2 kháng thể và kháng nguyên protein CagA. ELISA gián tiếp được dùng phát hiện H. pylori mang cagA trong mẫu nước bọt và huyết thanh. Liều gây đáp ứng miễn dịch thích hợp là 20 g protein/con. Kháng thể thu được có ái lực cao với kháng nguyên, hiệu giá kháng thể kháng protein CagA là 51200 và thử nghiệm khả năng phản ứng của kháng thể thu được trên mẫu nước bọt và huyết thanh đạt kết quả khả quan. Từ khóa: Helicobacter pylori, kháng thể đa dòng, tác nhân gây ung thư. MỞ ĐẦU Việt Nam là nước có tỷ lệ nhiễm Helicobacter pylori cao và có