Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Nghiên cứu tách dòng và biểu hiện gen mã hóa protein NS1 của virut Zika ở vi khuẩn Escherichia coli

Bài viết nghiên cứu tách dòng và biểu hiện, tinh sạch protein NS1. Phương pháp nghiên cứu là tách dòng trình tự gen mã hóa protein NS1 vào vector TA và tiến hành chuyển sang vector pET-28A (+) tạo plasmid tái tổ hợp biểu hiện protein NS1 trong vi khuẩn E. coli. | T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2017 NGHIÊN CỨU TÁCH DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA PROTEIN NS1 CỦA VIRUT ZIKA Ở VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI Hoàng Quốc Trường*; Vũ Lê Quỳnh Chi*; Phan Quốc Hoàn* Park Huyn**; Vũ Xuân Nghĩa***; Lê Thị Quỳnh Mai**** TÓM TẮT Mục tiêu: nghiên cứu tách dòng và biểu hiện, tinh sạch protein NS1. Phương pháp: tách dòng trình tự gen mã hóa protein NS1 vào vector TA và tiến hành chuyển sang vector pET-28A (+) tạo plasmid tái tổ hợp biểu hiện protein NS1 trong vi khuẩn E. coli. Kết quả: NS1 biểu hiện thành công được xác nhận bằng kỹ thuật điện di biến tính SDS-PAGE và kỹ thuật chuyển thẩm miễn dịch. Đây là kết quả nghiên cứu bước đầu định hướng tạo bộ sinh phẩm chẩn đoán phát hiện virut Zika (ZIKV) tại Việt Nam. Kết luận: biểu hiện thành công NS1 protein. * Từ khóa: Virut Zika; E. coli; NS1. Cloning and Expression of a Full-Leng Recombinant NS1 Protein from Zika Virus in Escherichia coli Summary Objectives: In this study, Zika virus (ZIKV) NS1 was expressed and purified. Methods: Zika virus RNA was used as a template to produce DNA clones of the full-length NS1 genes via reverse transcriptase synthesis of cDNA by PCR amplification of the NS1 region. Products were cloned TA plasmid and subsequently subcloned into pET-28A (+) vector to construct a recombinant plasmid. The recombinant plasmid was transformed into E. coli BL21 strains and expressed NS1 protein. Results: Protein was identified by SDS-PAGE and western blotting. This research need to be further investigated to develop a NS1 diagnosis test of ZIKV in Vietnam. Conslusion: NS1 was expressed successfully. * Key words: Zika virus; E. coli; NS1. ĐẶT VẤN ĐỀ Virut Zika là một virut ARN thuộc họ Flaviviridae, chi Flavivirus, được phân lập lần đầu tiên từ khỉ vàng Uganda năm 1947. Năm 1954, ZIKV được phân lập từ 3 cư dân Nigeria. Cho đến nay, nhiều nghiên cứu khẳng định kháng thể kháng ZIKV đã tồn tại trên người được nhiều quốc gia châu Phi và một số nước châu Á mô tả, trong đó có Thái Lan,