Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Ứng dụng sắc ký ái lực miễn dịch để tinh chế kháng thể kháng độc tố domoic acid trong huyết thanh thỏ trắng New Zealand

Bài viết này trình bày kết quả thử nghiệm chế tạo cột sắc ký ái lực miễn dịch sepharose omega-aminohexyl với giá bắt kháng thể là bán kháng nguyên domoic acid để tinh chế kháng thể kháng domoic acid trong huyết thanh thỏ. | Ứng dụng sắc ký ái lực miễn dịch để tinh chế kháng thể kháng độc tố domoic acid trong huyết thanh thỏ trắng New Zealand Tạp chí Khoa học và Công nghệ Biển; Tập 17, Số 1; 2017: 103-109 DOI: 10.15625/1859-3097/17/1/9718 http://www.vjs.ac.vn/index.php/jmst ỨNG DỤNG SẮC KÝ ÁI LỰC MIỄN DỊCH ĐỂ TINH CHẾ KHÁNG THỂ KHÁNG ĐỘC TỐ DOMOIC ACID TRONG HUYẾT THANH THỎ TRẮNG NEW ZEALAND Đào Việt Hà*, Phạm Xuân Kỳ Viện Hải dương học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam * E-mail: daovietha69@gmail.com Ngày nhận bài: 24-6-2016 TÓM TẮT: Nhằm phục vụ phát triển bộ KIT ELISA phát hiện nhanh độc tố vi tảo domoic acid trong sản phẩm thủy sản tại Việt Nam, kháng thể kháng độc tố này đã được sản xuất bằng liệu pháp miễn dịch trên thỏ trắng New Zealand. Với ưu điểm có khả năng tinh sạch nhanh và cô đặc kháng thể, phương pháp sắc ký ái lực được lựa chọn để tinh chế kháng thể từ huyết thanh thỏ sau miễn dịch nhằm đáp ứng yêu cầu sử dụng làm vật liệu cho KIT ELISA. Tuy nhiên, do domoic acid là một bán kháng nguyên (hapten) nên không thể áp dụng nguyên tắc miễn dịch thông thường trong chế tạo cột sắc ký ái lực miễn dịch sử dụng độc tố này làm giá bắt kháng thể. Bài báo này trình bày kết quả thử nghiệm chế tạo cột sắc ký ái lực miễn dịch sepharose omega-aminohexyl với giá bắt kháng thể là bán kháng nguyên domoic acid để tinh chế kháng thể kháng domoic acid trong huyết thanh thỏ. Sử dụng cầu nối hóa học dissuccinyl substrate để tạo khả năng bắt kháng thể của phân tử domoic acid; sau đó, trên nguyên tắc kết hợp gốc carboxyl của phân tử domoic acid với gốc carbodiimide của hạt sepharose omega-aminohexyl, chúng tôi đã chế tạo thành công cột sắc ký ái lực bắt kháng thể kháng domoic acid với hiệu suất thu hồi đạt 91,5 ± 1,5% (n = 3) khi thử nghiệm với kháng thể chuẩn. Sử dụng cột sắc ký ái lực này với dịch giải cột lần lượt là NaCl 0,5 M; PBS 0,1 M và Ldy- HCl (pH 2,7) 0,1 M; đã thu nhận được kháng thể kháng domoic acid từ .