Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Luận văn : Bước đầu đọc trình tự vùng rDNA-ITS của nấm Rhizoctonia solani Kuhn part 3

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1. Kết quả phân lập mẫu Chúng tôi đã phân lập được 20 dòng nấm R. solani từ các mẫu thực vật bệnh và sử dụng 20 dòng nấm này để nghiên cứu. Bảng 3. Danh sách các dòng nấm Rhizoctonia solani được sử dụng trong nghiên cứu. Stt 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Tên dòng nấm CX-8 SR-650 L-74 XL-76 BV-62-03 L-67 RM-61 CB-63 LB-73 L-71-04 L-71-05 LB-70 L-67-04 B-61 L-61 L-73 L-74 CP-50-02 ĐX-61 CLV-72 Kí chủ Cải xanh. | PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1. Kết quả phân lập mẫu Chúng tôi đã phân lập được 20 dòng nấm R. solani từ các mẫu thực vật bệnh và sử dụng 20 dòng nấm này để nghiên cứu. Bảng 3. Danh sách các dòng nấm Rhizoctonia solani được sử dụng trong nghiên cứu. Stt Tên dòng nấm Kí chủ Nơi lấy mẫu 1 CX-8 Cải xanh Tp. HCM 2 SR-650 Sầu riêng Bình Dương 3 L-74 Lúa Trà Vinh 4 XL-76 Xà lách An Giang 5 BV-62-03 Bông vải Bình Thuận 6 L-67 Lúa Đồng Tháp 7 RM-61 Rau muống Đồng Nai 8 CB-63 Cải Bắp Lâm Đồng 9 LB-73 Lục bình Tiền Giang 10 L-71-04 Lúa Cần Thơ 11 L-71-05 Lúa Cần Thơ 12 LB-70 Lục bình Vĩnh Long 13 L-67-04 Lúa Đồng Tháp 14 B-61 Bắp Đồng Nai 15 L-61 Lúa Đồng Nai 16 L-73 Lúa Tiền Giang 17 L-74 Lúa Trà Vinh 18 CP-50-02 Cà phê Dắc Lắc 19 ĐX-61 Đậu xanh Đồng Nai 20 CLV-72 Cỏ lồng vực Long An 21 4.2. Li trích DNA Theo qui trình li trích của Lee và Taylor 1990 chúng tôi thu được DNA tổng số của nấm R. solani. Qui trình này không sử dụng RNase nên không loại bỏ được RNA. DNA tổng số được kiểm tra chất lượng bằng cách điện di trên gel agarose 0 8 . Kết quả diện di cho thấy DNA tổng số của các dòng nấm R. solani có xuất hiện và rõ nhưng chạy thành vệt dài hình 5 . Điều này cho thấy DNA tổng số li trích theo qui trình này còn chứa nhiều tạp chất chưa được sạch. DNA tổng số Hình 5. Ảnh điện di DNA tổng số của các dòngnấm R. solani li trích theo qui trình của Lee và Taylor chưa xử lí RNAse. Để phản ứng PCR dược tối ưu thì sản phẩm DNA li trích cần phải tương đối sạch các tạp chất. Khi DNA khuôn còn lẫn protein hiệu quả của phản ứng PCR giảm tỉ lệ thuận với độ tinh sạch của DNA khuôn Khuất Hữu Thanh 2003 . Vì vậy để có DNA khuôn tinh sạch hơn chúng tôi đã cải tiến qui trình của Lee và Taylor bằng cách lặp lại khâu khử bỏ protein và các thành phần không mong muốn khác trong mẫu phân tích. Cụ thể là sau bước 6 của qui trình Lee và Taylor chúng tôi thêm các bước sau Từ bước 1 - 6 giống qui trình Lee và Taylor. Bước 7 cho thêm 400pl hỗn hợp dung dịch chloroform isoamyl 24 1 . Bước 8 li tâm .