Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Luận văn : THỬ NGHIỆM SẢN XUẤT KHÁNG HUYẾT THANH KHÁNG VI KHUẨN E. coli part 5

Dựa vào nguyên tắc này các nhà sản xuất tạo ra các bộ kít chẩn đoán phát hiện vi sinh vật gây bệnh để ngƣời chăn nuôi có thể tự mình kiểm tra xem vật nuôi có mang mầm bệnh hay không nhƣ bộ kit chẩn đoán bệnh đốm trắng cho tôm. | Bảng 3.2 Gây miên dịch thu kháng thê theo qui trình dài ngày qui trình viện Pasteur Tp. HCM Mũi mẫn cảm Mũi nhắc lại 1 Mũi nhắc lại 2 Mũi nhắc lại 3 Mũi nhắc lại 4 Mũi nhắc lại 5 Ngay Tho 0 1 14 28 42 56 70 84 98 112 126 140 154 L.máu ml Tiêm ml L.máu ml Tiêm ml L.máu ml Tiêm ml L.máu ml Tiêm ml L.máu ml Tiêm ml L.máu ml Tiêm ml L.máu ml 6 1 2 1 2 1 2 1 1 5 50 1 5 50 1 5 Lấy hết 5 2 2 2 1 5 1 5 1 5 4 1 5 1 5 1 5 1 1 1 3 1 1 1 0 75 0 75 0 75 L. máu lấy máu Lấy máu kiểm tra kháng thể vào các ngày 0 14 42 70 98 126 154. IO 25 3.4.2. Thu nhận kháng huyết thanh Kháng huyết thanh thu vào các ngày 25 30 35 ở qui trình 1 bảng 3.1 và ở các ngày 98 126 154 ở qui trình 2 bảng 3.2 Trước khi lấy máu tráng ống bằng nước muối sinh lí 0 85 Vnước muối sinh lí 0 1 thể tích máu Lấy máu ở tĩnh mạch tai Sau khi lấy máu xong dùng que cấy khử trùng vét xung quanh ống Cho NaN3 vào VNaN3 0 05 Vmáu Để qua đêm ở 4oC Tách lấy huyết thanh sau đó li tâm bỏ phần cặn. Kháng huyết thanh được chia làm 2 phần Phần 1 để nguyên kháng huyết thanh bổ sung glycerol Vglycerol 10 VKHT . Bảo quản ở 4oC. Phần 2 kháng huyết thanh được tủa trong amonium sulfate bão hòa. KHT nguyên được sử dụng trực tiếp trong phản ứng ngưng kết hoặc cho gắn với protein A của Staphylococcus aureus hoặc xử lí hấp phụ với kháng nguyên vi khuẩn E. coli E68 và sau đó dùng cho phản ứng ngưng kết đánh giá hiệu giá kháng thể. Việc Sơ đồ 3.2 Qui trình chung về xử lí kháng huyết thanh 26 3.4.2.I. Tách kháng thể bằng amonium sulfate bão hoà Máu sau khi để ở 4oC qua đêm đem li tâm tách kháng huyết thanh Cho vào mỗi chai đựng huyết thanh lượng PBS 1X VPBS 3Vhuyết thanh Tủa huyết thanh thỏ bằng dung dịch amonium sulfate 100 S V NH4 2SO4 Vhuyết thanh VPBS Huyết thanh thỏ PBS 1X được để trong nước đá bào trên máy khuấy từ Nhỏ từng giọt NH4 2SO4 100 S. Sau khi cho hết lượng NH4 2SO4 vào tiếp tục khuấy 45 - 60 phút Để 4oC qua đêm Li tâm tách kết tủa Rửa tủa 3 lần bằng dung dịch NH4 2SO4 45 Cho vào ống 50 ml giữ tủa amonium sulfate 45 ở 4oC Đối