Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Thí nghiệm Sinh học phân tử - Bài 3

GIEO HẠT IN-VITRO I.CHỌN MÔ CẤY VÀ XỬ LÝ MÔ CẤY 1.1 Chọn lựa mô cấy Không có những hướng dẫn cụ thể trong việc chọn mô cấy. Về nguyên tắc, trừ những mô cấy đã hóa gỗ, các mô khác trong cơ thể thực vật đều có thể dùng làm mô cấy. Tuy vậy có thể nhận xét chung là các mô đang phát triển, thịt quả non, lá non, cuống hoa, đế hoa, mô phân sinh khi đặt vào môi trường có chứa một lượng chất sinh trưởng thích hợp đều có khả năng phân chia và. | Thí nghiệm Sinh học phân tử - 1 - Biên soạn Lê Lý Thuỳ Trâm BÀI 3 GIEO HẠT IN-VITRO A A I.CHỌN MÔ CẤY VÀ XỬ LÝ MÔ CẤY 1.1 Chọn lựa mô cấy Không có những hướng dẫn cụ thể trong việc chọn mô cấy. về nguyên tắc trừ những mô cấy đã hóa gỗ các mô khác trong cơ thể thực vật đều có thể dùng làm mô cấy. Tuy vậy có thể nhận xét chung là các mô đang phát triển thịt quả non lá non cuống hoa đế hoa mô phân sinh. khi đặt vào môi trường có chứa một lượng chất sinh trưởng thích hợp đều có khả năng phân chia và phân hóa. Để bắt đầu nghiên cứu nhân giống vô tính một cây nhất định trước tiên người ta chú ý đến các chồi nách và mô phân sinh ngọn. Cần biết rằng tuy mang một lượng thông tin di truyền như nhau các mô khác nhau trên cùng một cây có thể sinh trưởng và phát triển với khả năng tái sinh chồi rễ hay cây hoàn chỉnh rất khác nhau. Vì vậy khi khởi sự chọn giống nhân giống một cây cụ thể bằngphương pháp nuôi cấy môvà tế bào thực vật trước hết cần thí nghiệm tìm hiểu phản ứng của các bộ phận khác nhau của cấy trong nuôi cấy ở các nồng độ chất sinh trưởng khác nhau. Sau khi cấy mô cấy cần được đặt trong điều kiện nhiệt độ và ánh sáng ổn định. Tuỳ vào các mục đích nghiên cứu mà có các chế độ chiếu sáng khác nhau chẳng hạn quá trình tạo mô sẹo có thể cần bóng tối hay ánh sáng nhưng quá trình tái sinh và nhân giống vô tính nhất thiết phải có ánh sáng. Nhiệt độ phòng nuôi nên giữ ổn định 25 2oC bằng máy điều hòa nhiệt độ. Cường độ chiếu sáng khoảng từ 2000 -3000 lux. 1.2 Xử lý vô trùng mẫu cấy Mẫu đưa vào nuôi cấy invitro có nhiều nguồn gốc khác nhau. Có thể là những mẫu cấy đã vô trùng như cây con invitro cho nảy mầm trong điều kiện vô trùng cũng có thể đó là các mẫu cấy chưa vô trùng lấy trực tiếp từ bên ngoài tự nhiên như chồi non lá thân củ rễ. Thuận lợi nhất là sử dụng các mẫu cấy đã vô trùng bởi lẽ các phương pháp vô trùng mẫu cấy trực tiếp thường ít nhiều gây hại cho mẫu cấy do chất khữ trùng gây ra. Có nhiều phương thức vô trùng mẫu cấy a. Vô trùng hạt - Rửa hạt bằng xà phòng .