Phenol Muối NaCl, muối , muối Dung dịch đệm PBS (phosphate buffer saline) Sodium azid NaN3. Protein tái tổ hợp MBP-VT2eB Đệm borat Formol Thuốc nhuộm xanh methylene Nƣớc cất Syringe vô trùng 1ml và 5ml Effendof 1,5ml Tủ cấy vô trùng Máy li tâm lạnh Tủ ấm CO2 Đĩa polystyren 96 giếng Miếng plastic dán đĩa polystyren Chai nuôi tế bào Roux 25, 80cm2 Pippete man Pippete Pasteur Đầu côn 1000 l,100 l Ống thủy tinh 3ml Máng nhựa tiệt trùng Kính hiển vi soi ngƣợc IOD3 Máy Spectrophotomer Buồng đếm hồng cầu GASSALEM Tủ lạnh 2-8oC, tủ. | 19 - Phenol - Muối NaCl muối muối - Dung dịch đệm PBS phosphate buffer saline - Sodium azid NaN3. - Protein tái tổ hợp MBP-VT2eB - Đệm borat - Formol - Thuốc nhuộm xanh methylene - Nước cất Dụng cụ thí nghiệm - Syringe vô trùng 1ml và 5ml - Effendof 1 5ml - Tủ cấy vô trùng - Máy li tâm lạnh - Tủ ấm CO2 - Đĩa polystyren 96 giếng - Miếng plastic dán đĩa polystyren - Chai nuôi tế bào Roux 25 80cm2 - Pippete man - Pippete Pasteur - Đầu côn 1000 l 100 - Ống thủy tinh 3ml - Máng nhựa tiệt trùng - Kính hiển vi soi ngược IOD3 - Máy Spectrophotomer - Buồng đếm hồng cầu GASSALEM - Tủ lạnh 2-8oC tủ lạnh -20oC - Đĩa petri 3cm - Dụng cụ đục lỗ - Lò microwave - Cân phân tích 19 20 PHƯƠNG PHÁP Bố trí thí nghiệm - Tiến hành khảo sát trên 5 lô số lượng heo con 5 cá thể lô phân bố ngẫu nhiên từ heo con lớn nhất trong bầy của 5 nái J Lô 1 lô đối chứng không tiêm vac-xin chỉ tiêm chất bổ trợ. J Lô 2 tiến hành tiêm 1 lần vào lúc 14 ngày tuổi với liều 50pg protein tái tổ hợp ml. J Lô 3 tiêm 2 lần vào lúc 14 ngày tuổi và 24 ngày tuổi với liều 5 0 1g protein tái tổ hợp ml. J Lô 4 tiến hành tiêm 1 lần vào lúc 14 ngày tuổi với liều 75 pg protein tái tổ hợp ml. S Lô 5 tiêm 2 lần vào lúc 14 ngày tuổi và 24 ngày tuổi với liều 75 pg protein tái tổ hợp ml. Lô 1 2 3 4 5 Liều tiêm pg ml 0 50 50 75 75 Số lần tiêm 0 1 2 1 2 tiêm chất bổ trợ Al OH 3 2 lần 1ml con Cách pha dịch tiêm - Chuẩn bị dịch Al OH 3 vô trùng - Pha liều protein tái tổ hợp với thể tích tương ứng với Al OH 3 để đạt hàm lượng 50pg hay 75pg protein tái tổ hợp ml. Sau đó lắc đều trong thời gian 45 phút. Phân phối vào các chai nhỏ 2 liều chai bảo quản ở 4oC cho đến khi tiêm. - Mỗi lần tiêm 1ml. Tiêm bắp. Lấy máu Máu được lấy ngay trước khi tiêm và mỗi tuần một lần sau khi tiêm ở tất cả các cá thể thí nghiệm cho đến 42 ngày tuổi. Lấy máu heo dùng syringe lấy 1ml máu ở xoang tĩnh mạch cổ. Sau đó để 4 oC qua đêm chắt lấy huyết thanh. Đem ly tâm 3000 vòng 5 phút thu dịch nổi chia .
