Bài viết Thiết kế cấu trúc chỉnh sửa gen ossweet liên quan đến bệnh bạc lá trên lúa TBR225 tiến hành phân tích TALome của một số chủng Xoo đại diện của Việt Nam để xác định chính xác trình tự EBE và gen S trong hệ gen giống lúa TBR225 và thiết kế cấu trúc CRISPR/Cas9 nhận biết các EBE này. | KHOA HỌC CÔNG NGHỆ THIẾT KẾ CẤU TRÚC CHỈNH SỬA GEN OsSWEET LIÊN QUAN ĐẾN BỆNH BẠC LÁ TRÊN LÚA TBR225 Trần Lan Đài1 Phùng Thị Thu Hương2 Cao Lệ Quyên2 Nguyễn Văn Cửu2 Nguyễn Thị Thu Hà2 Phạm Xuân Hội2 Nguyễn Duy Phương2 TÓM TẮT Bệnh bạc lá lúa do vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzae Xoo gây ra những thiệt hại nghiêm trọng cho sản xuất lúa gạo của nhiều quốc gia châu Á và châu Phi. Trong quá trình xâm nhiễm vào cây chủ Xoo tiết ra protein đặc biệt TAL Transcription activator like effector protein này liên kết với các yếu tố cis đặc trưng trên vùng promoter và hoạt hóa biểu hiện của một số gen trong hệ gen cây chủ để phục vụ cho quá trình sinh trưởng và lây nhiễm của vi khuẩn trong cây. Trong nghiên cứu này đã nghiên cứu TALome của 3 isolate chủng phân lập Xoo đại diện của Việt Nam. Isolate VXO_11 mang gen tal mã hóa protein AvrXa7 và PthXo2B trong khi VXO_60 và VXO_96 mang gen mã hóa TAL AvrXa7 và PthXo2A. Bốn trình tự crRNA CRISPR RNA đặc hiệu cho 2 vị trí DNA liên kết với TAL AvrXa7 và PthXo2A trên promoter OsSWEET13 và OsSWEET14 của giống lúa TBR225 đã được thiết kế bằng các công cụ tin sinh. Các crRNA đã được ghép nối vào vị trí BtgZI và BsaI trên vector trung gian pENTR4 toàn bộ cấu trúc biểu hiện sgRNA đã được chuyển vào vector pCas9 để tạo cấu trúc T-DNA biểu hiện phức hệ CRISPR Cas9 Clustered regularly interspaced short palindromic repeats CRISPR associated protein 9 hoàn chỉnh gây đột biến đồng thời hai promoter OsSWEET13 và OsSWEET14 của lúa TBR225. Đây sẽ là tiền đề cho việc tạo giống lúa TBR225 mới kháng bệnh bạc lá phổ rộng bằng công nghệ CRIPSR Cas9. Từ khóa Bạc lá CRISPR Cas9 SWEET TAL Xanthomonas oryzae pv. oryzae. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ2 TAL AvrXa7 và PthXo3 và các chủng châu Phi mang TAL effector được tạo ra từ các vi khuẩn gây protein TAL TalC và Tal5 tấn công vào các EBE bệnh thực vật thuộc chi Xanthomonas trong đó có tương ứng nằm trên promoter OsSWEET14 10 1 . Xoo là một vũ khí phân tử được tiêm vào tế bào nhân Như vậy khi phân tích TALome các chủng .
