chứng dương Armored RNA cChủng E. coli DH5α và E. coli BL21(DE3) được sử dụng để tách dòng gen và tạo hạt Armored RNA. Mục tiêu của nghiên cứu này là nhằm tạo chế phẩm Armored RNA dùng làm kiểm chứng dương cho quy trình Real-time RT-PCR phát hiện MARV mới được xây dựng bởi nhóm nghiên cứu chúng tôi. | Tạp chí phân tích Hóa Lý và Sinh học - Tập 28 Số 4 2022 NGHIÊN CỨU TẠO ARMORED RNA LÀM CHỨNG DƯƠNG CHO REAL-TIME RT-PCR PHÁT HIỆN VIRUS MARBURG Đến tòa soạn 24-08-2022 Nguyễn Thị Thu Hoài1 Nguyễn Thị Nga1 Bùi Liêm Chính1 Phạm Thị Thu Hương1 Phùng Huyền Nhung1 Vương Thanh Hương1 Trần Khánh Ngọc2 Nguyễn Thị Thùy Linh2 Nguyễn Minh Anh2 Lê Quang Hòa 2 1. Viện Khoa học và Công nghệ Bộ Công an 2. Viện Công nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm Đại học Bách khoa Hà Nội Email SUMMARY PREPARATION OF ARMORED RNA AS A POSITIVE CONTROL FOR REAL-TIME RT-PCR DETECTING MARBURG VIRUS Marburg virus is the causative agent of a severe viral hemorrhagic fever in human with high mortality rate. This study aims to prepare virus-modified particles based on MS2 bacteriophage to be used as a positive control for the diagnosis of Marburg virus by Real-time RT-PCR. To this aim the target region of Real-time RT-PCR assay was cloned into the pMC037-HisMS2_PLP_pac plasmid generating expression vector pMS2-MARV-NP. MS2-like particles were then produced in E. coli BL21 DE3 and were purified by Ni-NTA affinity chromatography. Analysis by SDS-PAGE and agarose gel electrophoresis transmission electron microscopy and real-time RT-PCR showed that the His-tagged Armored RNA particles carrying the target region were successfully assembled and purified at high concentration 108 copies µL by RT-qPCR quantification while DNA plasmid contamination was negligible. Most importantly these armored RNA particles were found to be resistant to RNase A. These findings reveal the potential of Armored RNA technology for rapid preparation of ribonuclease- resistant viral RNA controls. Keywords Armored RNA Marburg virus MS2 bacteriophage Real-time RT-PCR. 1. ĐẶT VẤN ĐỀ 252 ca mắc được ghi nhận Towner et al. Theo tổ chức Y tế Thế giới WHO virus 2006 . Trong hai năm gần đây một số ca tử Marburg MARV là tác nhân gây bệnh tối vong do MARV tại Guinea và Ghana cũng đã nguy hiểm cho loài người với
