Trong nghiên cứu này, nuclease mới được phát triển có khả năng nhắm mục tiêu G-quadruplex song song và thực hiện chức năng cắt tại vị trí đặc hiệu. Enzyme mới được tạo ra bằng phương pháp kết hợp phân tử peptit RHAU53 có khả năng nhận diện G-quadruplex song song với vùng protein xúc tác cắt của Fok1, tạo nên protein dung hợp RHAU53-Fok1. | TNU Journal of Science and Technology 228 09 80 - 86 GENERATION OF A NUCLEASE TARGETING PARALLEL G-QUADRUPLEX FOR SPECIFIC CUTTING OF DOUBLE STRANDED DNA Dang Thanh Dung Ho Chi Minh City Open University ARTICLE INFO ABSTRACT Received 07 3 2023 G-quadruplex is a secondary structure of DNA or RNA that plays an important role in many biological processes such as replication Revised 16 5 2023 transcription translation and elongation of telomeres. Therefore the G- Published 16 5 2023 quadruplex structure has emerged as a target molecule for drugs designation in biomedical applications. In this study a novel nuclease KEYWORDS which was developed can specifically target parallel G-quadruplex and play its catalytic function at a specific position. The novel nuclease was G-quadruplex genetically generated by fusing a parallel G-quadruplex-recognized RHAU53-Fok1 RHAU53 peptide motif with a catalytic protein domain of Fok1 resulting in the generation of RHAU53-Fok1. The fusion protein could Nuclease be expressed in E. coli under IPTG inducer and purified by the his-tag DNA affinity chromatography. Interestingly RHAU53-Fok1 can selectively Specific cutting bind a parallel G-quadruplex and cut a double stranded DNA next to it. Cleavage of double stranded DNA by RHAU53-Fok1 showed multiple cutting sites on the substrate resulting in a major fragment and several minor fragments. The novel nuclease provides a useful tool for recognizing and mapping the G-quadruplex structure in the genome. TẠO ENZYME NUCLEASE CÓ KHẢ NĂNG NHẬN DIỆN CẤU TRÚC G- QUADRUPLEX SONG SONG VÀ CẮT DNA TẠI VỊ TRÍ ĐẶC HIỆU Đặng Thanh Dũng Trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh THÔNG TIN BÀI BÁO TÓM TẮT Ngày nhận bài 07 3 2023 G-quadruplex là cấu trúc bậc 2 của DNA hay RNA mà đóng vai trò quan trọng trong các quá trình sinh học như sao chép phiên mã dịch Ngày hoàn thiện 16 5 2023 mã và kéo dài các telomeres. Do đó cấu trúc G-quadruplex được Ngày đăng 16 5 2023 xem như một phân tử mục tiêu trong việc thiết kế
