Tách dòng, biểu hiện và tinh sạch kháng nguyên tái tổ hợp NS1 chung có các điểm epitope nhận biết được kháng thể kháng bốn chủng vi rút Dengue (DENV). Phương pháp nghiên cứu: Đoạn gen mã hóa cho kháng nguyên NS1 chung bốn chủng được gắn chèn vào vector pET22b+ sau đó được biến nạp vào chủng tế bào BL21. | TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 6 - 2023 TẠO DÒNG VÀ BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP NS1 CHUNG BỐN CHỦNG VI RÚT DENGUE TRONG VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI Hoàng Xuân Cường1 3 Đỗ Như Bình1 Vũ Minh Thương2 Bùi Thùy Linh2 Nguyễn Thị Thanh Thảo1 Trương Công Định1 Bùi Minh Trường1 Bùi Thế Ngọc1 Lâm Thảo Nguyên1 Võ Thị Bích Thủy2 Tóm tắt Mục tiêu Tách dòng biểu hiện và tinh sạch kháng nguyên tái tổ hợp NS1 chung có các điểm epitope nhận biết được kháng thể kháng bốn chủng vi rút Dengue DENV . Phương pháp nghiên cứu Đoạn gen mã hóa cho kháng nguyên NS1 chung bốn chủng được gắn chèn vào vector pET22b sau đó được biến nạp vào chủng tế bào BL21. Sản phẩm tái tổ hợp được kiểm tra bằng các phương pháp PCR enzyme cắt giới hạn giải trình tự và SDS-PAGE. Kết quả Đoạn gen mã hóa kháng nguyên tái tổ hợp NS1 có kích thước 417 bp mã hóa tạo chuỗi polypeptide dài 139 amino acid và tương đồng 100 với trình tự chuỗi polypeptide của kháng nguyên NS1 chung cho bốn chủng DENV đã được công bố trên GenBank. Kết quả điện di trên SDS-PAGE cho thấy protein tái tổ hợp 6xHis-rNS1 có khối lượng phân tử khoảng 18 kDa. Kết luận Biểu hiện thành công kháng nguyên tái tổ hợp NS1 chung bốn chủng DENV trong tế bào . Đây là kết quả nghiên cứu bước đầu định hướng tạo kháng thể đơn dòng chẩn đoán phát hiện bốn chủng DENV tại Việt Nam. Từ khóa Vi rút Dengue NS1 Kháng nguyên tái tổ hợp. 1 Học viện Quân y 2 Viện Nghiên cứu hệ gen Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam 3 Viện Sốt rét ký sinh trùng Trung ương Bộ Y tế Tác giả liên hệ Võ Thị Bích Thủy Ngày nhận bài 07 6 2023 Ngày được chấp nhận đăng 28 7 2023 http 16 TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 6 - 2023 CLONING AND EXPRESSION OF GENE ENCODING RECOMBINANT NS1-DENV1-4 SEROTYPE ANTIGEN IN ESCHERICHIA COLI Abstract Objectives To study the cloning expression and purification of the general NS1 antigen with epitope-detectable antibodies against four Dengue virus DENV serotypes. .
